大豆耐盐性鉴定和SgP5CS基因遗传转化

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大豆是中度耐盐作物,对盐胁迫有一定的自我调节能力,但在高浓度盐害情况下无法正常的生长,最终造成作物的减产。因此利用传统育种方法和生物技术来筛选和培育耐盐大豆品种,提升大豆在盐渍土中的生产力能力,既可以提升当前我国的大豆产量,解决供需不足问题,又可以改良土壤,具有很好的社会和经济效应。本研究分别对栽培大豆和转基因大豆进行芽期、苗期和全生育期的耐盐性鉴定。其中采用室内水培法分别将98份大豆品种和57份鲜食大豆进行萌芽期和苗期的耐盐性鉴定,并通过隶属函数法对20个转基因大豆材料进行田间耐盐性评价,为今后培育耐盐大豆品种提供依据。1.98份大豆材料芽期耐盐性评价:对98份大豆材料进行盐胁迫,通过测定种子发芽率、发芽势、芽长和侧根数进行耐盐性筛选,结果发现在120mM氯化钠的处理下,大豆种子的发芽情况存在明显差异。其中茶豆、浙鲜9号、26008-1、SP349和浙764-38表现出较高的耐盐性;而矮脚白毛、浙鲜21等58个品种表现出中度耐盐性;SP327、03276等35个大豆品种未表现出耐盐性。2.57份鲜食大豆材料苗期耐盐性评价:对苗期的大豆间隔一周分别进行100mM氯化钠和150mM氯化钠胁迫,根据植株的盐害指数进行耐盐性等级评定。结果发现有8个品种表现出高耐盐性,9个品种表现出耐盐性,12个品种表现出中度耐盐性,10个品种表现对盐胁迫敏感,18个品种对盐胁迫高度敏感。盐胁迫下表现出高度敏感的品种较多,其次为中度耐盐型,高度耐盐品种最少。其中502、早绿、3D099、辽31-7和U3112耐盐性强,在盐胁迫下受影响小,而H069、SMV006和VP10的盐害指数较高,受到盐害后植株干枯接近死亡,无法生长。3.20个转基因大豆新材料田间耐盐性鉴定:本试验还采用隶属函数法分别对20个转基因大豆进行田间耐盐性鉴定,结果在200mM氯化钠胁迫下初步鉴定出J001、J357、J358、J378耐盐品种4个和J002、J067、J070、J379、J354中度耐盐品种5个。4.SgP5CS基因的遗传转化:P5CS基因过表达使植物体内脯氨酸含量上升,增强植物的应急防御能力和提升植物的耐受性。本实验对从碱蓬中克隆出P5CS基因(SgP5CS),构建植物表达载体SgP5CS-pCAMBIA1301-gfp,采用农杆菌介导的花序浸润遗传转化方法,将碱蓬中SgP5CS转入到拟南芥中,通过T1代目的基因的PCR检测,初步表明SgP5CS已整合到拟南芥基因组中。
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