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目的:本研究通过建立体外H2O2诱导的BRL-3A细胞损伤模型,开展人参对损伤模型具有保护作用的物质基础筛选,在此基础上,探索人参活性成分通过调控肝细胞的线粒体及糖异生功能从而发挥其保护肝细胞损伤的作用机制。为人参发挥补气、供能功效的进一步研究提供数据支撑。方法:1.使用H2O2进行造模,损伤肝细胞后,给予人参三种有效成分处理,MTT法检测肝细胞的存活率,确定细胞密度、损伤时间、给药浓度以及人参最佳有效成分等。2.采用流式细胞技术检测各组BRL-3A细胞凋亡的水平,MMP的变化及ROS检测。3.采用ELISA检测技术检测各组BRL-3A细胞肝糖原、ATP、SOD、MDA、G6P、PEPCK等。4.采用RT-PCR技术开展不同给药组目标基因转录水平变化、Western blot技术开展目标蛋白表达量的变化,通过外源性加入PGC-1α抑制剂开展人参多糖发挥保护作用的可能作用靶点研究。结果:1.经筛选,人参三种有效成分中人参多糖优于人参蛋白及人参皂苷(p<0.05),人参多糖对H2O2损伤的大鼠肝细胞有显著的恢复作用,且呈时间-剂量依赖关系,其最有效浓度为1.6mg/ml(P<0.05)。2.经流式细胞术检测,人参多糖能有效降低细胞凋亡水平,通过提高线粒体膜电位来恢复H2O2对肝细胞的损伤,同时,降低氧化应激导致的活性氧升高,均呈浓度依赖关系。3.与单独H2O2作用的损伤组相对比,人参多糖减弱了H2O2诱导的Bax蛋白表达水平的上调,同时,在q PCR水平上,Bcl-2/Bax表达升高,有效的阻止了凋亡的发生(p<0.05)。4.人参多糖能够恢复氧化应激造成的肝糖原降低及ATP含量降低,经过提高SOD、减少MDA来削弱H2O2产生的损伤,以及提高G6P、PEPCK含量来恢复肝细胞糖异生的功能,从而探究人参多糖的药效物质机制研究。5.通过蛋白免疫印迹法及q PCR技术证实,人参多糖作用后能够明显升高PGC-1α的表达(p<0.05),且呈现浓度依赖性。人参多糖依赖于SIRT1/PGC-1α通路提高PGC-1α的表达,PGC-1α抑制剂干预后,PGC-1α的蛋白水平明显降低(p<0.05),人参多糖对受损肝细胞的保护作用下降。结论:1.人参多糖对H2O2诱导的大鼠肝细胞损伤有一定的保护作用且呈浓度-剂量依赖关系。2.人参多糖通过降低MMP来恢复肝细胞线粒体功能,使线粒体正常产生ATP,从而提高ATP含量。3.人参多糖通过提升肝细胞糖异生功能、降低氧化应激损伤来恢复肝细胞功能,从而恢复肝糖原的输出。4.人参多糖通过激活SIRT1/PGC-1α信号通路,提高PGC-1α的表达来降低氧化应激对肝细胞的损伤。