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目的：肥胖是胰岛素抵抗的重要危险因素,而且与2型糖尿病的发展有着密切的关系,主要是由于巨噬细胞浸润和局部炎症,与过度肥大的脂肪组织缺氧有关。我们应用C57/BL6小鼠造成胰岛素抵抗模型,检测其脂肪组织及骨骼肌巨噬细胞浸润情况,脂肪组织缺氧情况以及胰岛素信号。方法：第一部分高脂饮食喂养4周龄C57/BL6小鼠16周,建立胰岛素抵抗模型作为实验组(n=10),相同条件下普通饮食喂养4周龄C57/BL6小鼠,作为对照组(n=10),分别在0周、4周、8周、12周、16周记录小鼠体重,通过腹腔糖耐量试验(IPGTT)监测小鼠胰岛素抵抗水平,在0周、16周将小鼠断颈处死,取小鼠股四头肌、腓肠肌及睾周脂肪备用。第二部分将高脂饮食喂养0周、16周的C57/BL6小鼠睾周脂肪组织及腓肠肌分别进行包埋,组织切片,Mac-2免疫组化(IHC)染色巨噬细胞的方法检测脂肪组织与肌肉组织的巨噬细胞浸润情况,缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)免疫组化检测脂肪组织中HIF-1α的表达。第三部分分别提取两组C57/BL6小鼠股四头肌及睾周脂肪组织蛋白,应用免疫印迹(Western Blot)法测定胰岛素刺激前后蛋白激酶B (Akt)的磷酸化水平。第四部分收集16名非肥胖(BMI<28kg/m2)与18名肥胖(BMI>28kg/m2)女性腹部脂肪组织,Real-time PCR测定缺氧诱导因子-1α (HIF-1α) mRNA的表达,Western Blot检测HIF-1α蛋白的表达,免疫组化(IHC)检测HIF-1α在脂肪组织中的表达。检测空腹外周血血糖(FBG)和胰岛素(FINS),计算HOMA指数评估胰岛素抵抗。结果：第一部分结果显示：与对照组小鼠相比,高脂饮食喂养8周-16周,高脂组小鼠体重显著升高(p<0.005,p<0.001, p<0.001)。IPGTT试验显示,在16周时,高脂组小鼠在0min、30min、60min、90min、120min时血糖都显著升高(p<0.05,p<0.001,p<0.001,p<0.0001,p<0.001)第二部分结果显示：高脂饮食喂养前,与对照组小鼠相比,高脂饮食组小鼠脂肪组织与骨骼肌中巨噬细胞浸润无显著性差异,而高脂饮食喂养16周后,与对照组小鼠相比,高脂饮食组小鼠脂肪组织中脂肪细胞体积大于对照组小鼠,而且可见较多的巨噬细胞浸润,而且HIF-1α的表达升高；骨骼肌中也可见较多的巨噬细胞浸润。第三部分结果显示：高脂饮食喂养前,与各自基础组相比,两组小鼠脂肪组织和骨骼肌中胰岛素刺激后Akt的磷酸化水平显著升高(p＜0.01；p<0.05),且升高倍数无显著性差异；而高脂饮食喂养16周后,与相同周龄的对照组小鼠相比,高脂饮食组小鼠脂肪组织和骨骼肌中胰岛素刺激前后Akt的磷酸化水平无显著差异。第四部分结果显示：与非肥胖组相比,肥胖组腹部脂肪组织HIF-1α mRNA和蛋白的表达均显著升高(p<0.028,p<0.005)。且肥胖组HOMA指数显著高于非肥胖组(p<0.01); HIF-1α mRNA和蛋白表达与HOMA指数之间存在相关性(r=0.360,p<0.05; r=0.343,p<0.05)。结论：1.高脂饮食喂养小鼠16周后,小鼠肥胖,并且造成其胰岛素抵抗,胰岛素抵抗模型建立成功。2.高脂饮食喂养后小鼠脂肪组织和骨骼肌巨噬细胞浸润增多,脂肪组织中HIF-1α的表达升高。3.高脂饮食显著降低小鼠脂肪组织及骨骼肌胰岛素刺激后Akt磷酸化水平。4.肥胖患者脂肪组织HIF-1α的表达升高,并存在周身胰岛素抵抗。且两者具有相关性。本课题应用C57/BL6小鼠,高脂饮食喂养16周,建立胰岛素抵抗模型,探讨高脂饮食造成胰岛素抵抗的机制,并在人脂肪组织中进行验证,有助于临床对胰岛素抵抗更为深入的认识。