论文部分内容阅读
目的：①自体移植法建立内异症大鼠模型，观察成模情况。②观察内异症移植灶情况对大鼠生育力的影响。③比较各组MUC-1、Galectin-3的mRNA和蛋白质的表达，探讨二者对子宫内膜异位症大鼠模型生育力的影响。
方法：48只8周龄雌性S-D大鼠随机分为内异症组(Em)32只、假手术组(Sham)8只和空白对照组(Norm)8只，对Em组采用自体移植法建模。4周后剖腹探查成模情况，取建模成功者共25只行进一步实验。上述3组符合条件的雌鼠与雄性大鼠按2∶1合笼，从行阴道涂片见精子之日起分笼饲养，第10日处死大鼠结束实验并计数胚胎数。进一步分为妊娠组和非妊娠组。留取所有大鼠子宫和移植灶HE染色行相关组织学检查、免疫组化实验对MUC-1、Galectin-3蛋白的表达进行检测;荧光定量PCR(real time PCR)实验对MUC-1、Galectin-3mRNA的表达进行检测。
结果：⑴自体移植法移植的子宫组织可以存活，移植成活率可达89.29％。Em组胚胎着床数为6.33±1.23胎(n=17);Sham组的胚胎着床数为8.57±1.51胎(n=6);Norm组的胚胎着床数为6.81±0.65胎(n=8)，组间比较有统计学意义(P=0.01)。对Em组大鼠来说，Person相关性分析显示，合笼前移植灶评分的高低与妊娠10天时胚胎着床数呈明显负相关性(r=-0.568，P=0.03)，评分越高，胚胎着床数越低。⑵免疫组化:MUC-1在子宫内膜及移植灶的腔上皮、腺上皮和间质细胞的胞质中均有表达。MUC-1在妊娠期时Em组、Sham组及Norm组各组阳性染色细胞数分别为19.35％、21.17％和23.13％，组间差异无统计学意义(P＞0.05)。MUC-1在非妊娠期Em组子宫组织中阳性染色细胞占28.75％，非妊娠期Norm组子宫组织中阳性染色细胞占57.25％，后者明显高于前者，组间差异有统计学意义（P=0.00）。MUC-1在非妊娠期移植灶阳性染色细胞占66.88％，而妊娠期移植灶的阳性染色细胞只占24.29％，后者较前者下降42.59％。Galectin-3在子宫内膜及移植灶的腔上皮、腺上皮的胞质中均有表达。在妊娠期Em组、Sham组及Norm组阳性染色细胞数分别为20.76％、22.33％和25.62％，组间差异无统计学意义(P＞0.05)。Galectin-3在非妊娠期Em组子宫组织中阳性染色细胞占29.12％，非妊娠期Norm组子宫组织中阳性染色细胞占63.13％，后者明显高于前者，组间差异有统计学意义(P=0.00)。Galectin-3在非妊娠期移植灶阳性染色细胞占73.38％，而妊娠期移植灶的阳性染色细胞只占23.18％，后者较前者下降50.2％。⑶Real time PCR结果:妊娠期，Sham组和Norm组的MUC-1mRNA的表达量均较Em组高，分别是其2.28倍和2.16倍，三组组间差异无统计学意义(P＞0.05)。非妊娠期正常子宫组织MUC-1 mRNA相对表达量是Em未孕组的1.19倍;非妊娠期移植灶MUC-1mRNA相对表达量是妊娠期移植灶的2.99倍;在非妊娠期，Em组移植灶MUC-1mRNA相对表达量是子宫组织的2.01倍。妊娠期，Sham组和Norm组的Galectin-3mRNA的表达量均较Em组高，分别是其2.08倍和2.21倍，三组组间差异有统计学意义（P＜0.05）。非妊娠期正常子宫组织Galectin-3mRNA相对表达量是Em未孕组的1.15倍;非妊娠期移植灶上Galectin-3mRNA相对表达量是妊娠期移植灶的2.51倍;在非妊娠期，Em组移植灶Galectin-3mRNA相对表达量是子宫组织的1.69倍。MUC-1mRNA、Galectin-3mRNA的表达量与胚胎着床数的相关性:子宫MUC-1 mRNA相对量与着床数均呈正相关趋势，达到统计学显著水平(EM:r=0.834，P=0.00; Sham: r=0.803，P=0.03)。子宫Galectin-3mRNA相对量与着床数均呈正相关趋势，达到统计学显著水平(EM: r=0.866，P=0.00; Sham:r=0.763，P=0.02)。
结论：①自体子宫内膜移植法可用于S-D大鼠子宫内膜异位症模型的构建。②对移植灶生长情况进行大体的评分客观上反映了内异症的严重程度，且评分高低与妊娠后胚胎着床数负相关。③MUC-1、Galectin-3表达下调与子宫内膜异位症大鼠的生育力之间存在相关性，其可作为反映子宫内膜容受性的标志物。