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目的本课题组以前期研究发现,糖尿病创面中巨噬细胞表型转化障碍现象为切入点,探讨糖尿病或高糖环境对巨噬细胞表型表达调控分子micro RNA-155(mi R-155)水平的影响,及其对调控巨噬细胞表型表达的机制。方法1)以人白血病单核细胞株(THP-1细胞)经佛波酯刺激后形成的巨噬细胞为研究对象。探讨高糖环境下mi R-155的表达变化;检测CD86阳性的M1型巨噬细胞和CD206阳性的M2型巨噬细胞表达率差异,同时检测巨噬细胞吞噬荧光微珠的平均荧光强度,以了解mi R-155对巨噬细胞表型和吞噬功能的影响。应用ELISA方法研究巨噬细胞表型改变与相关炎症因子IL-6和IL-10表达的关系。2)运用RT-PCR及Western Blot方法,检测高糖环境下mi R-155对巨噬细胞表型转化调控相关基因SOCS1及STAT1的影响。3)制作STZ诱导糖尿病大鼠模型,并在背部制作组织缺损伤,动态观察正常对照组、糖尿病生理盐水(PBS)组以及糖尿病局部应用mi R-155抑制组的创面愈合率;运用免疫组化、RT-PCR方法观察三组创面中巨噬细胞表型标记物和mi R-155表达水平。4)应用RT-PCR及Western Blot方法,检测mi R-155对糖尿病创面中巨噬细胞表型转化调控相关基因的影响。结果1)巨噬细胞在高糖环境下,mi R-155和CD86表达显著增高,CD206表达及吞噬功能无明显差异。2)高糖环境下,抑制mi R-155后可使CD206表达和吞噬功能升高,IL-6表达减少,IL-10表达升高;高糖环境下,抑制mi R-155后可使SOCS1及STAT1的m RNA表达升高,SOCS1的蛋白水平升高,而其下游的p-STAT1蛋白水平受到抑制。3)创面愈合率在在糖尿病PBS对照组和糖尿病mi R-155抑制组无显著差异。4)在糖尿病大鼠创面应用mi R-155抑制剂可使CD206升高;SOCS1及STAT1 m RNA水平表达升高;SOCS1蛋白水平提高,而其下游的p-STAT1蛋白水平受到抑制;使IL-6水平下降以及IL-10水平升高。结论糖尿病或高糖状态下,巨噬细胞以炎性状态的M1型表达为主,同时伴有mi R-155水平的升高;抑制mi R-155后,M2表型上升,并可通过上调其靶基因SOCS1,由此下调p-STAT1,从而对巨噬细胞表型起到调控作用。