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【目的】利用实时荧光定量PCR方法研究弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者中miR-21的表达情况,分析其表达水平与DLBCL患者免疫亚型,临床病理特征及预后的关系,阐明miR-21表达在DLBCL发生发展的意义,探究P53、Bcl-2蛋白与miR-21的关系,为DLBCL分子靶向治疗提供依据。【方法】1.病例收集:收集并筛选出临床资料完整的生存状况齐全50例DLBCL组织病例标本,和12例正常淋巴结。2.确定B细胞来源的肿瘤细胞:应用免疫组织化学EnVision二步法检测标记LCA、CD45RO、CD3、CD20等蛋白的表达情况。3.对所有病例分型:按Hans等的分型方法标记CD10、Bcl-6和MUM-1蛋白,根据它们的表达情况将病例分成生发中心B细胞型(GCB型)和非生发中心B细胞型(non-GCB型)两组。4.实时荧光定量PCR技术检测miR-21表达的情况,并与临床因素及预后作相关性分析。5.免疫组化标记Bcl-2和P53蛋白的表达情况,并与miR-21的表达作相关性分析。【结果】1.本组DLBCL病例(50)中GCB亚型和non-GCB亚型分别为19例(38.0%),31例(62.0%);GCB亚型的生存率高于non-GCB亚型(p=0.039)。2.本组DLBCL病例中miR-21高表达和miR-21低表达分别为34例(68.0%),26例(32.0%);miR-21高表达DLBCL患者的生存率低于miR-21低表达患者(p=0.038)。3.本组DLBCL病例中P53阳性表达和阴性表达分别为21例(42.0%),29例(58.0%); P53阳性表达的患者的生存率也明显较低(p=0.017)。4.miR-21表达水平与Bcl-2的表达水平呈负相关(p=0.02)和P53蛋白水平正相关(p=0.022)。5.对50例DLBCL患者临床资料(性别,部位直径,淋巴结转移,分期),miR-21表达情况,Bcl-2蛋白表达和P53蛋白表达进行单因素Cox分析和多因素Cox分析,单因素结果发现,miR-21表达情况(p=0.046),免疫亚型(p=0.046),P53(p=0.022)和临床分期(p=0.022)跟预后有统计学意义,其他因素均无统计学意义。多因素Cox分析结果发现miR-21表达(p=0.002),分期(p=0.000),P53(p=0.007)和免疫亚型(p=0.000)有统计学意义,其他因素无统计学意义。【结论】1.GCB亚型的DLBCL预后要好于non-GCB型,对DLBCL进行亚分型是有利于预后的判断。2.实时荧光定量PCR检测发现miR-21在DLBCL中呈现高表达的,miR-21在non-GCB中比GCB中表达更高,miR-21高表达的患者生存率明显低于miR-21低表达的,说明miR-21在DLBCL发生中可能具有致癌作用。3.检测P53蛋白、Bcl-2蛋白表达有助于DLBCL患者的预后判断,可进一步完善临床分期,为患者治疗提供合理的依据。4.miR-21的靶蛋白可能是Bcl-2、P53,对DLBCL的靶向治疗提供理论依据。5.miR-21、P53、分期、免疫亚型可以作为DLBCL的预后指标。