过去认为F₁F₀-ATP合成酶只表达定位在线粒体膜上,但近年来越来越多的研究发现其亚基也分布在一些细胞的细胞质膜上,称为质膜异位F₁F₀-ATP合成酶。许多肿瘤细胞表面都存在F₁F₀-ATP合成酶,但是不同肿瘤细胞表面F₁F₀-ATP合成酶的量不同。F₁F₀-ATP合成酶β亚基的功能性单克隆抗体能够增强癌细胞及其耐药株对化疗药物的敏感性。本文旨在研究F₁F₀-ATP合成酶β亚基在肿瘤细胞中的定位及其表达量差异对细胞增殖的影响,进一步探讨肿瘤细胞膜表面表达F₁F₀-ATP合成酶的功能。为研究F₁F₀-ATP合成酶β亚基在肿瘤细胞中的定位,我们利用荧光标记载体使β亚基带有荧光标签。从细胞中提取总RNA,反转录得到cDNA第一链,通过PCR扩增atp5b基因,克隆到真核表达载体pEGFP–N1中,转染细胞后,荧光显微镜下观察发现细胞表面确实有荧光存在。为研究F₁F₀-ATP合成酶β亚基表达量差异对细胞增殖的影响,我们设计了3个shRNA片段干扰ATP5B蛋白的表达,转染细胞后分别在正常条件和缺氧条件下培养,MTT法检测细胞增殖能力,发现shRNA1、shRNA2组细胞增殖率大于1,shRNA3组细胞增殖率小于1。