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目的：研究多发性骨髓瘤细(MM)胞系和临床标本中环氧二十碳三烯酸(EETs)的表达情况。方法：培养U266和RPMI8226细胞,Elisa法检测细胞中11,12-EET和14,15-EET的水平。收集多发性骨髓瘤患者外周血标本和临床相关指标,离心分离血清,Elisa法检测血清中11,12-EET和14,15-EET以及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的水平,统计学分析EETs的水平与MM临床相关指标的相关性。RT-PCR法检测P450表氧化酶亚家族成员CYP2J2的mRNA表达水平。结果：骨髓瘤细胞U266和RPMI8226中均存在11,12-EET和14,15-EET的表达。2×106/m1的U266细胞中11,12-EET的水平为239789.80±50297.81pg/ml,14,15-EET的水平为642293.81±28930.74pg/ml;相同数目的RPMI8226细胞中11,12-EET为188487.56±58858.03pg/ml,14,15-EET为536489.31±21331.71 pg/ml的。骨髓瘤患者的血清中也存在11,12-EET和14,15-EET的表达,且水平显著高于健康对照者(P＜0.01)。但EETs的水平与多发性骨髓瘤不良预后因子如LDH和β2-微球蛋白以及VEGF之间的无相关性(P>0.05)。P450表氧化酶亚家族成员CYP2J2在骨髓瘤细胞U266中表达,但在RPMI(?)3226细胞中未检测到CYP2J2的mRNA表达。结论：多发性骨髓瘤中存在11,12-EET和14,15-EET的表达。骨髓瘤患者血清中EETs的水平显著高于健康对照者,提示EETs可能是多发性骨髓瘤的病理特征之一。目的：研究P450-EETs途径在多发性骨髓瘤细胞增殖和凋亡中的影响,并对相关机制进行探讨。方法：Elisa法检测经17-ODYA作用后U266和RPMI8226细胞中11,12-EET和14,15-EET水平的变化。MTT法检测11,12-EET,14,15-EET和17-ODYA对骨髓瘤细胞增殖的影响。流式细胞术检测17-ODYA对U266和RPMI8226细胞凋亡率和细胞周期的影响。凋亡和细胞周期相关蛋白Bax,Bcl-2,cyclinDl的表达由western blotting法检测。结果：17-ODYA的作用降低U266和RPMI8226细胞中11,12-EET和14,15-EET的水平,抑制骨髓瘤细胞的增殖。100μmol/L的17-ODYA作用于U266细胞48小时后,细胞内11,12-EET的水平下降至126844.34±21873.65pg/ml,14,15-EET的水平下降至386152.86±62308.52pg/ml,对U266细胞的增殖抑制率为50.85±3.64%,与对照组相比较,均有统计学意义(P<0.05)。外源性EETs的作用可促进骨髓瘤细胞的增殖,并可逆转17-ODYA介导的骨髓瘤细胞增殖的下降。400nmol/L的11,12-EET作用于U266和RPMI8226细胞达48h后,MM细胞的增殖率分别为58.05±3.64%和89.7±3.64%,与溶剂组相比较均有统计学意义(P<0.05)。17-ODYA可诱导凋亡相关蛋白Bcl-2表达的下降,Bax的升高,周期蛋白CyclinDl表达的下降,从而使得骨髓瘤细胞的凋亡增加和细胞在G。/G1期的阻滞。100μmol/L的17-ODYA作用于U266细胞48小时后,凋亡率为8.6±0.3%,对照组为2.5±1.25%(P<0.01)；100μmol/L的17-ODYA作用于RPMI8226细胞48小时后,G。/G1期细胞比例由31.72±0.55%上升至39.38±0.8%(P<0.05)。结论：P450-EETs途径可影响多发性骨髓瘤细胞增殖和凋亡,17-ODYA可抑制骨髓瘤细胞的增殖,并可能成为骨髓瘤治疗的新手段。目的：研究环氧二十碳三烯酸(EETs)在多发性骨髓瘤(MM)细胞培养上清中的表达及其在多发性骨髓瘤诱导的血管新生中的作用。方法：培养多发性骨髓瘤细胞系U266和RPMI8226细胞,制备其培养上清液,Elisa法检测其培养上清中11,12-EET和14,15-EET的水平。培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),MM细胞培养上清液作用于HUVEC,应用MTT法,transwell迁移实验,小管形成实验和matrigel plug实验来检测两种MM细胞系诱导HUVEC增殖,迁移,小管形成和体内血管形成的能力。17-ODYA作用于U266和RPMI8226,MTT法和小管形成实验观察17-ODYA对MM细胞诱导的HUVEC增殖和小管形成的作用,Elisa法观察对MM细胞培养上清中11,12-EET和14,15-EET的影响。结果：U266和RPMI8226可分泌11,12-EET和14,15-EET至培养上清中,且U266细胞培养上清中两种EETs的水平均明显高于RPMI8226(P<0.05)。U266的培养上清可诱导HUVEC的增殖,迁移,小管形成和matrigel plug中的血管新生,与RPMI8226组相比较,均明显高于RPMI8226组(P<0.05),这种促血管新生的能力与两种MM细胞系培养上清中EETs的水平呈正相关。17-ODYA,是一种P450表氧化酶的抑制剂,作用于U266和RPMI8226后,可抑制MM细胞诱导HUVEC的增殖和小管形成,与对照组相比较,具有统计学意义(P<0.05)。同时,17-ODYA可降低U266和RPMI8226培养上清中11,12-EET和14,15-EET的水平。结论：来源于MM细胞的EETs在多发性骨髓瘤的血管新生中起到重要作用,其抑制剂17-ODYA可抑制此效应。目的：本实验观察17-ODYA对多发性骨髓瘤(MM)细胞迁移和侵袭的影响,并对其机制进行初步探讨。方法：Transwell模型检测17-ODYA对U266和RPMI8226迁移和侵袭的影响,明胶酶谱法检测17-ODYA对U266和RPMI8226培养上清中基质金属蛋白酶(MMP)-2和-9的影响,western blotting法检测17-ODYA对MM细胞中MMP-2, MMP-9, p-Akt, Akt和HIF-1a的影响。结果：17-ODYA可抑制U266和RPMI8226的迁移和侵袭,与对照组相比较,具有显著统计学意义(P<0.01),且这种效应呈时间依赖性。100μmol/L的17-ODYA作用24小时后,U266和RPMI8226培养上清中MMP-2和MMP-9的活性下降,且在其在U266和RPMI8226细胞中的蛋白水平也同时下降。17-ODYA的作用下调了Akt的磷酸化水平,但对Akt和HIF-1a的蛋白水平却无影响。结论:17-ODYA通过抑制MMPs的活性和表达及对相关信号通路的调控实现抑制多发性骨髓瘤细胞的迁移和侵袭,有望成为骨髓瘤治疗的新措施。