桃离体培养及叶片再生体系的建立

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本文以油桃品种曙光、野生毛桃、毛桃品种试材砂子早生、蟠桃品种早露蟠桃和甘肃桃为试材,在建立稳定高效的桃组织培养与快繁技术体系基础上,优化叶片再生不定梢的组织培养体系,提高植株再生率,建立了高频植株再生体系。主要结果如下:(1)建立、优化了桃离体快繁体系。研究了取材时间、基本培养基、培养条件和消毒方法对初代培养的影响,结果表明:曙光、砂子早生、野生毛桃和早露蟠桃的外植体于3、4、5、9和10月份取材,萌发率较高,而甘肃桃在3~10月份取材,萌发率无显著差异,均保持在79%以上;理想的初代培养基是LP培养基,萌发率是MS培养基的2.1倍;光照强度10001x有利于外植体的萌发;探明一种污染率仅2%且外植体伤害轻的消毒方案;在继代培养过程中,基本增殖培养基、不同浓度植物生长调节物质组合和pH经3次继代筛选,得出较好的基本培养基和植物生长调节物质组合分别为LP培养基、BAP0.75mg/L+IBA0.3 mg/L,而SH+TDZ0.75mg/L+NAA0.3 mg/L是甘肃桃最佳增殖培养基,适宜的pH5.4~5.8;(2)研究了以桃叶片为外植体再生不定梢的条件与技术,建立了一套高频再生体系。分析了3种不同来源的叶片、再生培养基、叶片成熟度和试材在树冠上的位置对叶片再生的影响,研究表明:理想的外植体是来自再生不定梢上的幼嫩叶片,不定芽再生率达到最高45%,而来自增殖培养新梢和预培养茎尖的叶片,再生率均低于33%;较佳的再生培养基:SH+TDZ3.0mg/L+NAA0.3mg/L;充分扩展的幼嫩叶片以1.0~1.5cm长最好,再生率高出0.5~1.0cm长3倍以上;试材取材母株树冠的形态学下部有利于叶片再生。所有再生不定芽均能成苗并表现出正常的形态特征。(3)对再生的不定梢进行生根研究,获得了再生植株。研究了培养条件、基本培养基和植物生长调节物质对不定梢生根的影响,结果表明;不定梢在温度24±1℃,光照强度为3001x环境中培养10d,再转到25001x环境中培养20d,其生根率达100%,平均每个新梢产生3.86条有效根;最适生根培养基是1/2LP+NAA1.0mg/L+IBA1.0mg/L。
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