近年来,随着水产养殖的集约化发展,养殖水产品细菌性疾病不断爆发,给水产养殖业带来巨大的经济损失。水产麻醉剂丁香酚具有良好的抑菌和杀菌作用,不仅对食源性致病菌具有良好抑制作用,也对水产致病菌具有潜在抑菌效力。本文旨在探索丁香酚对水产养殖主要致病菌鳗弧菌的抑菌效果和抑菌机理,以期为丁香酚作为抑菌剂应用于水产养殖提供基础数据。本研究首先初步开展了丁香酚对鳗弧菌(Vibrio anguillarum)的抑菌效果研究,采用平板打孔法测得当丁香酚浓度为6400μg/mL时鳗弧菌培养平板中抑菌圈直径为21.13±0.74 mm,表明鳗弧菌对此浓度下丁香酚表现为极敏;通过微量二倍稀释法使用酶标仪于OD560nm测得丁香酚对鳗弧菌的最低抑菌浓度(MIC)为400μg/mL,取400μg/mL、800μg/mL和1600μg/mL微孔中培养液均匀涂抹于2216琼脂平板继续培养24 h,发现浓度≥800μg/mL时鳗弧菌没有生长,表明最小杀菌浓度(MBC)分别为800μg/mL。抑菌时效实验结果显示,400μg/mL的丁香酚在18 h内基本抑制了鳗弧菌的生长。即使在18 h后鳗弧菌开始缓慢生长,但是与空白对照组相比,对应时间(32~36 h)的吸光值仅为空白对照组的五分之一,表明丁香酚依然对鳗弧菌的生长存在较大的抑制作用。通过电导率实验来验证丁香酚对鳗弧菌细胞膜通透性的影响,电导率试验结果显示,MIC组和MBC组菌液的电导率增长远远大于空白对照组电导率的增长,表明MIC组和MBC组中鳗弧菌细胞膜通透性受到破坏,细胞内某些离子及导电小物质流到细胞外。且MBC组电导率增长略高于MIC组,表明800μg/mL的丁香酚对鳗弧菌细胞膜通透性的破坏大于400μg/mL的丁香酚,丁香酚对鳗弧菌细胞膜通透性的影响也受浓度的影响。通过分光光度法探究MIC浓度的丁香酚对鳗弧菌菌体蛋白、琥珀酸脱氢酶(SDH)和苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)的影响。结果表明,MIC组相比于空白对照组,鳗弧菌菌体蛋白减少了39.4%,SDH和NAD-MDH酶活性分别降低了45.85%和62.25%。最后通过SDS-PAGE凝胶电泳来观察MIC组及空白对照组各分子量菌体蛋白,结果显示分子量在25 KD到150 KD之间,MIC组的菌体蛋白条带相比于空白对照组,大部分条带都变浅,即这些分子量蛋白含量减少;少部分条带消失,可能是这些分子量蛋白合成减少或者流出菌体外。