AML1基因一种新转录本的鉴定与克隆

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目的(1)鉴定并克隆AML1基因一种新正常转录本5-6-5转录本的全长序列。(2)探讨5-6-5转录本的形成机制。(3)在本科室收集的病例中比较健康志愿者与急性髓系白血病患者AML1 5-6-5转录本表达量差异,并进行统计分析,得出结论。方法(1)应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction, RT-PCR)法联合测序分析,对发现的AML1新转录本进行鉴定。(2)通过RNase R消化处理,探讨该转录本的结构及形成机制(3)应用实时荧光定量PCR (Real-Time PolymeraseChain Reaction, real-time PCR)检测20名正常健康者与60例急性髓系白血病患者之间5-6-5转录本的表达量差异,并用非参数Kruskal Wallis检验进行统计学分析。结果(1)证实AML1 5-6-5转录本真实存在。(2)确定该转录本为无poly(A)尾,且具有抵抗RNase R消化的特性。(3)新转录本在几种正常细胞、肿瘤细胞系及几个其他物种表达情况与常规转录本相符合。(4)该转录本在正常健康者与急性髓系白血病患者之间表达量差异无统计学意义。结论(1)AML1基因这种新的转录本是由外显子5和外显子6首尾相接形成的环状RNA。(2)虽然在正常健康者与急性白血病患者之间其表达量差异无统计学意义,但它存在于人的不同组织细胞和细胞系,以及大鼠中。
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