NF-κB对肝癌细胞自噬形成的影响

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目的:研究抑制核转录因子(NF-κB)对肝癌细胞HepG2自噬的作用及影响。方法:常规培养HepG2细胞后分为2组:SN50处理组及空白对照组,然后采用MTT比色法检测细胞生长增殖、Western blot检测细胞内微管相关蛋白LC3-Ⅱ水平以及MDC染色后,采用荧光显微镜对自噬进行定性观察。结果:MTT检测SN50对HepG2细胞增殖的影响,与空白对照组比较,20μmol/L的SN50作用24、48、72h后,SN50处理组的吸光度值明显下降(P<0.05);说明细胞增殖受到显著抑制,抑制率分别为(20.45±3.7)%、(31.94±4.2)%和(36.44±4.6)%。通过Western印迹法,我们研究了自噬在蛋白水平的表达,SN50作用48h后HepG2产生的自噬相关蛋白LC3-Ⅱ水平的表达上调,作用前后差异有统计学意义(t=6.832,P=0.002)。在荧光显微镜下观察发现,染上MDC荧光的自噬泡颜色呈深绿色或黄绿色点状结构,大多都散布于核周,说明经SN50作用后肝癌细胞自噬活性增强。结论:阻断NF-κB可以在一定时间内显著抑制HepG2细胞的增殖,其机制有可能是增强细胞自噬作用引起。
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