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本试验以体外培养的大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(rat intestinal microvascular endothelial cells,RIMEC)为模型,探讨了猪水肿病主要毒力因子志贺样毒素Ⅱ型变异体(shiga like toxinⅡvariant,SLT-Ⅱe)对大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌功能及黏附分子表达的影响,并研究了筛选出的中药复方主要成分(茯苓酸、黄芪甲苷、黄芪多糖、大黄素、大黄酸、金丝桃苷及槲皮素)对SLT-Ⅱe诱导的大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌功能及黏附分子表达失调的影响,以期从调节微血管内皮细胞分泌功能,改善微循环角度,揭示中药复方治疗猪水肿病的抗炎机制和疗效机制。1.建立了猪水肿病病理模型,并从临床治疗猪水肿病的24服中药复方制剂中筛选出一服防治效果最佳的中药复方制剂(由茯苓、黄芪、大黄及山楂等组成)。2.采用猪水肿病主要毒力因子SLT-Ⅱe刺激大鼠肠黏膜微血管内皮细胞建立了猪水肿病的细胞病理模型,确定SLT-Ⅱe最佳作用剂量为1μg/mL。1μg/mL SLT-Ⅱe诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞NO、ET-1、PGI2、TXA2、P-选凝素、sICAM-1的分泌浓度均显著高于相应对照组的分泌浓度。3.应用ELISA、硝酸还原酶法及原位杂交等方法,检测了茯苓的主要成分茯苓酸对大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌功能及黏附分子表达的影响,试验结果显示茯苓酸对SLT-Ⅱe诱导的肠黏膜微血管内皮细胞NO、ET-1、TXA2及sICAM-1的分泌具有较强的抑制作用。原位杂交结果显示SLT-Ⅱe主要诱导肠黏膜微血管内皮细胞iNOS mRNA的表达;茯苓酸下调SLT-Ⅱe诱导的肠黏膜微血管内皮细胞iNOS mRNA、ecNOS mRNA、ET-1 mRNA及ICAM-1 mRNA的表达。4.采用ELISA、硝酸还原酶法及原位杂交等方法,检测了黄芪的主要成分黄芪甲苷、黄芪多糖对大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌功能及黏附分子表达的影响,试验结果显示黄芪甲苷对SLT-Ⅱe诱导的肠黏膜微血管内皮细胞NO、ET-1、sICAM-1的分泌具有较强的抑制作用。原位杂交结果显示黄芪甲苷对SLT-Ⅱe诱导肠黏膜微血管内皮细胞iNOS mRNA、ET-1 mRNA及ICAM-1 mRNA的表达有下调作用。黄芪多糖对SLT-Ⅱe诱导的肠黏膜微血管内皮细胞NO、ET-1、TXA2、sICAM-1的分泌具有下调作用。5.使用ELISA、硝酸还原酶法及原位杂交等方法,检测了大黄的主要成分大黄素、大黄酸对大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌功能及黏附分子表达的影响,试验结果显示大黄素对SLT-Ⅱe诱导的肠黏膜微血管内皮细胞NO、ET-1、PGI2、P-选凝素、sICAM-1的分泌具有较强的抑制作用。原位杂交结果显示大黄素对SLT-Ⅱe诱导的肠黏膜微血管内皮细胞iNOS mRNA、ET-1 mRNA及ICAM-1 mRNA的表达有下调作用。大黄素也可上调SLT-Ⅱe诱导的肠黏膜微血管内皮细胞AQP1 mRNA表达下降。大黄酸对SLT-Ⅱe诱导肠黏膜微血管内皮细胞NO、ET-1、P-选凝素、sICAM-1的分泌具有下调作用。6.采用ELISA、硝酸还原酶法及原位杂交等方法,检测了山楂主要成分金丝桃苷、槲皮素对大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌功能及黏附分子表达的影响,试验结果显示金丝桃苷对SLT-Ⅱe诱导的肠黏膜微血管内皮细胞NO、ET-1、TXA2、sICAM-1的分泌具有明显的下调作用。原位杂交结果显示金丝桃苷对SLT-Ⅱe诱导的肠黏膜微血管内皮细胞iNOS mRNA、ET-1 mRNA及ICAM-1 mRNA的表达有下调作用。槲皮素对SLT-Ⅱe诱导肠黏膜微血管内皮细胞NO、ET-1、PGI2、TXA2、sICAM-1的分泌具有下调作用。通过上述较为系统研究,提示中药复方主要成分茯苓酸、黄芪甲苷、黄芪多糖、大黄素、大黄酸、金丝桃苷及槲皮素治疗猪水肿病的作用机制可能是下调微血管内皮细胞NO、ET-1、PGI2、TXA2、P-选凝素、ICAM-1的分泌,调控微血管内皮细胞功能,调节AQP1的表达,改善体内微循环。