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目的:观察超声波用于螺旋藻硒多糖(Polysaccharide from Se-enrichedSpimlina Platensis,Se-PSP)提取的可行性,并对实验条件进行优化:分离纯化Se-PSP并测定其糖与蛋白的含量,研究其体外对肿瘤细胞生长的影响。方法:通过正交实验设计优化超声波法提取螺旋藻硒多糖的实验条件;三氯乙酸法去除蛋白,DEAE-纤维素层析柱及8 kDa~10 kDa的透析袋对Se-PSP粗品进行分离纯化,应用硫酸-恩酮比色法、考马斯亮蓝G-250比色法,测定糖及蛋白的含量;用MTT比色法研究浓度为10μg/ml时Se-PSP总糖及其不同组分体外对SKOV-3细胞生长的影响,并研究不同浓度的Se-PSP2体外对SKOV-3细胞、HepG-2细胞、BGC-803细胞、CNE细胞和Tca-8113细胞生长的影响。结果:富硒螺旋藻干粉在pH 11和60℃的水浴条件下超声波处理60 min提取率最高,糖含量最多;经DEAE-纤维素柱层析分离得到4个不同分子量的多糖组分Se-PSP1、Se-PSP2、Se-PSP3和Se-PSP4;其中Se-PSP2组分是Se-PSP总糖的主要成分(含量占70.2%),透析纯化后糖含量为98.49%,蛋白含量为0.45%;MTT实验结果提示浓度在10μg/ml时,Se-PSP总糖及Se-PSP1、Se-PSP2、Se-PSP3和Se-PSP4对SKOV-3细胞生长的抑制率分别为(33.393±5.437)%、(22.290±8.399)%、(44.881±4.878)%、(45.354±4.931)%和(46.203±4.455)%;MTT比色法证实Se-PSP2能有效抑制SKOV-3、HepG-2、BGC-803和Tca-8113细胞的增殖,抗瘤谱较广,抑制作用有剂量依赖趋势。对不同的肿瘤细胞生长的抑制率有所不同,其中对SKOV-3卵巢癌细胞抑制作用最强,抑制率最高达到(45.202±4.401)%,对CNE鼻咽癌细胞抑制作用较弱,抑制率最高为(22.238±2.481)%。结论:螺旋藻硒多糖最佳提取方案是pH11和60℃的水浴条件下超声波处理60 min,分离纯化后的Se-PSP总糖及各组分对SKOV-3细胞体外生长均有抑制作用,Se-PSP2组分是Se-PSP总糖的主要成分,Se-PSP2能有效抑制多种肿瘤细胞的生长,抗瘤谱较广,并对不同的肿瘤细胞作用有所不同,有望成为治疗恶性肿瘤的良药。目的:研究一种从鲨鱼软骨(Shark Cartilage,SC)中提取低分子蛋白简便、快速的方法,并证实该方法提取的SC低分子蛋白能有效地抑制新生血管的形成。方法:以鲨鱼软骨为原料,粉碎后反复冻融,离心去沉淀,超滤、真空干燥后得到鲨鱼软骨低分子蛋白;光学显微镜及电镜下观察SC低分子蛋白作用72 h后,EVC304细胞的形态变化;体外实验观察它对内皮细胞增殖、黏附和迁移的影响,用鸡胚绒毛尿囊膜实验测定其对新生血管形成的影响。结果:SC低分子蛋白作用后,光镜观察EVC304细胞生长不良,细胞表面伪足消失,形态变圆、变小,皱缩,聚集成团,胞浆内颗粒增多,透亮度降低;电镜观察细胞核形态明显不规则,有丝分裂相明显减少;SC低分子蛋白在浓度超过50μg/ml时能有效抑制血管内皮细胞的增殖,在浓度超过5μg/ml时能有效抑制内皮细胞的黏附,并且此抑制作用均呈剂量依赖趋势;浓度在100μg/ml时EVC304细胞生长抑制率为(36.770±2.800)%、黏附抑制率为(52.954±4.442)%和迁移运动抑制率为(68.01±5.65)%;SC低分子蛋白作用48 h后,阴性对照组鸡胚绒毛尿囊膜的新生血管数目为(18.750±3.671)根,低分子蛋白实验组为(7.167±1.529)根,差异有统计学意义(P<0.05),SC低分子蛋白能有效抑制鸡胚绒毛尿囊膜的新生血管的形成。结论:我们采用将SC冻融超滤法获取的鲨鱼软骨低分子蛋白,可以抑制内皮细胞生长、黏附和迁移运动,进而抑制新生血管的形成,有望成为抑制肿瘤血管生长的新型靶向药物。目的:筛选鲨鱼软骨(Shark Cartilage,SC)低分子蛋白联合螺旋藻硒多糖(Polysaccharide from Se-enriched Spirulina Platensis,Se-PSP)的最佳配伍浓度,观察二者联合应用对荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响。方法:SC低分子蛋白和Se-PSP分别按20∶1、10∶1、5∶1、2.5∶1、1:1、1∶2.5、1∶5、1∶10和1∶20质量比混合,测定其体外对SKOV-3细胞生长和黏附运动的抑制作用,对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管形成的抑制作用;选Balb/c小鼠50只,随机分为5组,连续给药10 d后,用刀豆蛋白A(ConA)诱导和改良MTT法观察各实验组小鼠脾淋巴细胞增殖情况;选C57BL/6小鼠60只,随机分为6组,建立荷Lewis肺癌肿瘤小鼠模型,连续给药10 d后,计算各组瘤体抑制率。结果:SC低分子蛋白联合Se-PSP对SKOV-3细胞生长和黏附运动均有抑制作用,浓度比5∶1时作用最强,抑制率分别是(51.108±4.618)%、(53.303±5.194)%;鸡胚绒毛尿囊膜新生血管形成抑制实验发现,当配伍浓度比在20∶1、10∶1和5∶1时各实验组鸡胚绒毛尿囊膜新生血管数目分别为(6.02±0.748)、(5.200±0.980)和(5.600±0.800)根,三者两两比较没有统计学差异(P>0.05),但与其他配伍组相比差异有统计学意义(P<0.05):小鼠脾淋巴细胞增殖实验结果显示,5∶1配伍组小鼠脾淋巴细胞增殖指数(1.831±0.035)明显高于SC低分子蛋白组(1.533±0.046)和Se-PSP组(1.624±0.043),三者分别与生理盐水组(1.367±0.058)相比差异均有统计学意义(P<0.01),SC低分子蛋白和Se-PSP均有促进Balb/c小鼠脾淋巴细胞增殖作用,且联合应用疗效增强;肿瘤生长抑制实验结果显示,5∶1配伍组瘤体抑制率明显高于SC低分子蛋白组和Se-PSP组,5∶1混合物+环磷酰胺组明显高于环磷酰胺组,差异均有统计学意义(P<0.05),SC低分子蛋白和Se-PSP组分别与阴性对照组相比,差异也有统计学意义(P<0.05)。结论:鲨鱼软骨低分子蛋白和Se-PSP分别按5∶1质量比混合是理想的配伍,二者联合对实体瘤生长的抑制作用有联合增效作用,并能促进小鼠脾淋巴细胞增殖,提高小鼠免疫力,与化疗药物环磷酰胺联合有增强疗效的作用,有望成为治疗恶性肿瘤的的新药。