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目的:对贵州省内大丁草的野生资源进行调查,生物学特性和种子萌发特性进行实验观察研究,对野生和栽培药材质量比较,对不同采收期及不同产地加工方法药材质量进行试验研究,为大丁草的野生变家种提供技术参数和理论依据。
方法:1.采用文献资料查阅和路线调查法对贵州省内野生大丁草的分布区域和群落环境进行调查。2.建立引种圃对大丁草实生苗进行定株在圃观察,通过观察物候期、叶片数、叶片大小、株高等指标来总结其营养生长特性;通过观察期抽葶期及花葶生长过程及采用无纺布袋、尼龙袋等对其花序或单花进行相应的套袋实验,以研究大丁草的开花和授粉机制。3.采用四唑染色法并通过正交实验法来获得大丁草种子生活力最佳测定条件;以河沙、纱布、滤纸、脱脂棉、脱脂棉+滤纸作为发芽基质;以10℃、15℃、20℃、25C、30℃为发芽温度,以全光照、周期性光照和全黑暗为发芽光照,来获得大丁J草种子萌发的最适条件:4.以提取时间、乙醇体积和乙醇浓度为考察因素,在单因素试验的基础上,以总香豆素含量为响应值,利用Box-Behnken中心组合试验法进行响应面分析,优化大丁草药材中总香豆素的提取工艺。5.以折干率、含水量、浸出物、总香豆素4个指标对不同产地、野生和栽培药、不同药用部位、不同采收年限和物候期的药材样品进行质量评价。6.以折干率、含水量、浸出物、总香豆素4个指标对阴千、晒千和不同温度下烘干等干燥方法的药材进行评价。
结果:1.贵州省内72个县(区)调查,发现野生大丁草主要分布在花溪区、龙里县、威宁县、六枝特区等13个县(区),其生长环境主要为海拔1000~1300m被火烧过的灌草丛、灌木林间等草坡。2.大丁草为多年生植物,一年内生长期约为210天,生长发育期可划分为出苗期、展叶期、花期和果期,每年冬季地上部位枯萎。3.大丁草的授粉以同序异花方式为主,结实率为56.49%,尽管自交亲和,但是同序同花的授粉率极低,结实率仅为1.00%。4.大丁草种子生活力测定的最佳条件为染色温度40℃,染色时间180min,TTC溶液浓度1.0%,其种子的最佳发芽条件为以河沙基质、25℃、周期性光照。5.大丁草药材中总香豆素的最佳提取工艺为提取时间50min、料液比1∶40、乙醇浓度50%。6.13个不同产地野生药材样品中普定县白岩镇的总香豆素含量可达4.70%,显著高于其他产地;地.上部分的总香豆素含量可达4.33%,野生药材的总香豆素为4.61%,高于栽培药材;采收于花期的药材总香豆素含量为3.71%;晒干处理的药材总香豆素含量可达2.84%。
结论:大丁草在贵州省主要分布在高海拔地区,在--年内可以完成-一个完整的生活周期。种子在20~25℃温度范围内可萌发;四唑染色法可作为大丁草种子生活力检测法;初步建立了大丁草中在总香豆素的提取工艺,方法可靠,预测性理想;方差检验结合聚类分析可以评价不同产地、不同药用部位及野生与栽培的大丁草药材质量。
方法:1.采用文献资料查阅和路线调查法对贵州省内野生大丁草的分布区域和群落环境进行调查。2.建立引种圃对大丁草实生苗进行定株在圃观察,通过观察物候期、叶片数、叶片大小、株高等指标来总结其营养生长特性;通过观察期抽葶期及花葶生长过程及采用无纺布袋、尼龙袋等对其花序或单花进行相应的套袋实验,以研究大丁草的开花和授粉机制。3.采用四唑染色法并通过正交实验法来获得大丁草种子生活力最佳测定条件;以河沙、纱布、滤纸、脱脂棉、脱脂棉+滤纸作为发芽基质;以10℃、15℃、20℃、25C、30℃为发芽温度,以全光照、周期性光照和全黑暗为发芽光照,来获得大丁J草种子萌发的最适条件:4.以提取时间、乙醇体积和乙醇浓度为考察因素,在单因素试验的基础上,以总香豆素含量为响应值,利用Box-Behnken中心组合试验法进行响应面分析,优化大丁草药材中总香豆素的提取工艺。5.以折干率、含水量、浸出物、总香豆素4个指标对不同产地、野生和栽培药、不同药用部位、不同采收年限和物候期的药材样品进行质量评价。6.以折干率、含水量、浸出物、总香豆素4个指标对阴千、晒千和不同温度下烘干等干燥方法的药材进行评价。
结果:1.贵州省内72个县(区)调查,发现野生大丁草主要分布在花溪区、龙里县、威宁县、六枝特区等13个县(区),其生长环境主要为海拔1000~1300m被火烧过的灌草丛、灌木林间等草坡。2.大丁草为多年生植物,一年内生长期约为210天,生长发育期可划分为出苗期、展叶期、花期和果期,每年冬季地上部位枯萎。3.大丁草的授粉以同序异花方式为主,结实率为56.49%,尽管自交亲和,但是同序同花的授粉率极低,结实率仅为1.00%。4.大丁草种子生活力测定的最佳条件为染色温度40℃,染色时间180min,TTC溶液浓度1.0%,其种子的最佳发芽条件为以河沙基质、25℃、周期性光照。5.大丁草药材中总香豆素的最佳提取工艺为提取时间50min、料液比1∶40、乙醇浓度50%。6.13个不同产地野生药材样品中普定县白岩镇的总香豆素含量可达4.70%,显著高于其他产地;地.上部分的总香豆素含量可达4.33%,野生药材的总香豆素为4.61%,高于栽培药材;采收于花期的药材总香豆素含量为3.71%;晒干处理的药材总香豆素含量可达2.84%。
结论:大丁草在贵州省主要分布在高海拔地区,在--年内可以完成-一个完整的生活周期。种子在20~25℃温度范围内可萌发;四唑染色法可作为大丁草种子生活力检测法;初步建立了大丁草中在总香豆素的提取工艺,方法可靠,预测性理想;方差检验结合聚类分析可以评价不同产地、不同药用部位及野生与栽培的大丁草药材质量。