【摘 要】
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目的:观察中药复方槐花散合白头翁汤治疗大鼠急性放射性直肠炎的疗效,探讨其作用机制。方法:选用清洁级SD大鼠40只随机分为空白对照组(Control)、模型组(Model)、美沙拉嗪组(Mesalazine)、槐花散合白头翁汤组(BTW),每组10只。除Control组外其他三组大鼠盆腔均接受6MV-X射线20GY剂量照射,建立大鼠急性放射性直肠炎模型。待成模后每天给予相应药物灌胃治疗。灌胃后第14
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目的:观察中药复方槐花散合白头翁汤治疗大鼠急性放射性直肠炎的疗效,探讨其作用机制。方法:选用清洁级SD大鼠40只随机分为空白对照组(Control)、模型组(Model)、美沙拉嗪组(Mesalazine)、槐花散合白头翁汤组(BTW),每组10只。除Control组外其他三组大鼠盆腔均接受6MV-X射线20GY剂量照射,建立大鼠急性放射性直肠炎模型。待成模后每天给予相应药物灌胃治疗。灌胃后第14天处死所有大鼠,评估大鼠一般情况,HE染色法观察大鼠直肠黏膜组织病理学改变。通过16S r DNA测序技术检测ARP大鼠肠道菌群的变化。免疫印迹法(Western Blot)检测直肠组织中核转录因子-kappa B(NF-κB)、磷酸化核转录因子-kappa B(P-NF-κB)和TOLL样受体4(TLR4)的蛋白表达水平。免疫组织化学法(IHC)检测组织中磷酸化核转录因子-kappa B(P-NF-κB)和TOLL样受体4(TLR4)的蛋白表达水平。酶联免疫吸附法(Elisa)检测白介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的含量。所有数据采用SPSS 25.0统计软件进行分析,数据结果均以(?)±s表示,多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验,以P<0.05为有统计学差异。结果:1.大鼠灌胃治疗后,观察各组大鼠一般征象,与Contol组比较,Model组评分显著升高(P<0.01),Mesalazine组和BTW组一般征象评分低于Model组(P<0.05),BTW组评分略低于Mesalazine组(P>0.05)差异无统计学意义,BTW组和Mesalazine组一般征象评分较Model组低。2.观察大鼠直肠HE病理染色切片,Model组上皮细胞变形稀疏,部分糜烂、坏死、脱落,黏膜及黏膜下层出现明显的空泡样变性,间质纤维增多,大量炎症细胞浸润。Mesalazine组和BTW组,直肠上皮细胞完整性较好,腺体结构改变较轻,直肠黏膜形态结构较好,无明显溃烂、出血和炎性细胞浸润。3.取大鼠粪便经16Sr DNA基因测序后,发现Control组和Mesalazine组乳杆菌物种丰度高于Model组。4.Western Blot结果显示与Control组比较,Model组TLR4、P-NF-κB蛋白表达显著上升(P<0.05)。Model组TLR4、P-NF-κB蛋白表达显著高于Mesalazine组和BTW组(P<0.05)。5.免疫组化结果显示与Model组胞膜及胞浆黄染明显加深,提示P-NF-κB和TLR4表达与Control组相比显著增高;而Mesalazine组和BTW组胞膜及胞浆黄染较模型组变浅,较Control组颜色稍深,表明BTW组的P-NF-κB和TLR4蛋白表达减少。6.ELISA结果显示与Control组比较,Model组大鼠血清中TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1表达显著上升,具有统计学差异(P<0.05),Mesalazine组和BTW组大鼠血清中TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1水平显著低于Model组,具有统计学差异(P<0.05)。结论:1.槐花散合白头翁汤能够有效改善大鼠直肠黏膜形态结构,减轻炎症反应,进而改善急性放射性直肠炎大鼠腹泻、黏液便、脓血便等症状。2.槐花散合白头翁汤可调节肠道菌群,增加乳杆菌的菌群丰度。3.槐花散合白头翁汤治疗大鼠急性放射性直肠炎的作用机制与抑制TLR4/NF-κB信号通路,减少炎症因子释放有关。
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