开展中药小分子特别是多组分分子与蛋白质相互作用研究,可望为中药现代化进程中的中药药理、中药活性成分筛选、药物分子结构改造、科学理解传统中药复方以及药物配伍等环节提供理论依据和指导。本论文利用亲和色谱,采用前沿色谱和竞争置换实验方式,研究了阿魏酸、丹皮酚、葛根素、绿原酸、香草酸等五种中药活性成分与固定化人血清白蛋白(HSA)的相互作用,具体工作如下:1.采用前沿色谱法测定这五种中药活性成分在固定化HSA柱上的吸附量,应用Langmuir和Bi-Langmuir两种结合等温线模型判断五种中药活性成分与固定化HSA的结合位点种类数。结果表明,阿魏酸、丹皮酚、绿原酸、香草酸与HSA均只存在一类结合位点,而葛根素与HSA存在两类结合位点。2.采用竞争置换法中的自我竞争方式测定了这五种中药活性成分与HSA的结合常数,发现它们与HSA之间的结合属于弱结合作用。3.采用竞争置换法中的相互竞争方式研究了阿魏酸、丹皮酚、葛根素三种中药活性成分之间的相互竞争行为。结果表明,阿魏酸与丹皮酚竞争HSA上的同一类结合位点,且阿魏酸和丹皮酚共同竞争葛根素与HSA的一类结合位点。对中医理论上常用含有阿魏酸、丹皮酚、葛根素的中药配伍使用增强彼此疗效的现象进行了解释。利用探针试剂判断阿魏酸和丹皮酚与HSA作用的具体蛋白结合域为indole位点(siteⅡ)。4.研究了温度对其中四种中药活性成分与固定化HSA相互作用的影响,并根据热力学参数判断它们与HSA的作用力类型。结果表明,阿魏酸和丹皮酚与HSA的作用力类型为氢键和范德华力,绿原酸和香草酸与HSA的作用力类型为静电作用力。