影响大黄药材质量的部分关键因素研究

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大黄为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.、唐古特大黄Rheum tanguticum Maxim. ex Balf.或药用大黄Rheum officinale Baill的干燥根及根茎,是传统常用中药,亦是一味世界性中药。具有泻下攻积、清热泻火、凉血解毒、逐瘀通经、利湿退黄的功效。用于治疗实热便秘,口舌生疮,湿热泻痢,胃热呕吐,热毒疮疡,吐血、咯血、衄血等血热出血症,以及经闭,产后瘀滞,瘤瘕积聚,跌打损伤等。大黄主要分布于青藏高原、川西北高原区、川西高山峡谷区及盆地边缘山区,受5·12地震的影响,阿坝州灾区大黄药材种植遭到了一定程度的破坏。为了保护灾区药材资源,帮助灾区人民恢复和发展生产,加强灾区地质灾害治理与生态环境保护,国家启动了“十一·五国家科技支撑”项目“灾区药材资源恢复重建与综合开发利用研究及示范”。本文是其课题——“大黄种植恢复重建关键技术研究”的一部分。目前全国范围内已建立了较多的大黄种植基地,但由于受种质资源和种植技术的影响,生产出来的大黄药材质量千差万别,亟需对影响大黄药材质量的因素进行研究和规范。种子是中药质量的源头,确保种子的质量是中药生产的关键。本文针对大黄种子的质量,从净度、千粒重、水分、生活力、发芽率、发芽势、发芽指数等方面进行了全面的考察。首次以千粒重、生活力、发芽率、发芽势、发芽指数为指标,采用加权评分法和K-均值聚类法对4省15地的大黄种子进行综合评价,四川2、四川3、四川4、四川5、青海1、青海2、甘肃5所产大黄种子特性优良。对在室内常温和低温低湿条件下贮藏一年的大黄种子和不同贮藏年限的大黄种子特性进行了综合对比研究。室内常温条件下贮藏的种子生活力平均下降了24%左右,发芽率平均下降了8%左右,而低温低湿条件下贮藏的种子生活力平均只下降了10%左右,而其发芽率未见明显下降,确定大黄种子宜在低温低湿条件下贮藏。本文针对大黄出苗率低的现象,首次对大黄种子的抑制活性进行了研究,结果表明大黄果实和种子内含有一定的内源抑制物质,对胚根的生长具有明显的抑制作用。本文还对不同处理方法对大黄种子萌发的影响进行了研究,结果0.5mol/L~2.5mol/L的HCl均能显著地促进大黄种子的萌发。本文建立了适用于大黄的ISSR-PCR最佳扩增体系,并利用ISSR分子标记技术,首次对不同产地的大黄进行遗传多样性分析。从100条引物中筛选出了13条引物对所有样品进行扩增,共扩增出了149条谱带,多态性比率为83.22%。扩增结果表明利用ISSR引物可以将不同居群的大黄区别开来。聚类结果表明16个居群按地域分为了3个聚类群:甘肃聚类群、川西高原聚类群、青海聚类群。根据遗传多样性,并结合种子质量等因素,青海1、青海2、四川4、四川5的大黄种子可作为良种选育繁育的首选材料。针对大黄采收时间不一,初加工粗放的现象,本文对大黄的采收年限和产地初加工进行了研究,确定四川阿坝州大黄宜在种植4年后采收。大黄适宜的干燥方法为减压干燥法。
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