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目的:阐明骨髓间质干细胞(BM-MSC)向胃癌间质干细胞(GC-MSC)转分化的分子调控机制,基于胃癌微环境探寻胃癌治疗新靶标。方法:采用免疫荧光检测α-SMA、FAP的表达,定量PCR检测细胞因子的表达,Transwell迁移实验和侵袭实验检测胃癌细胞迁移及侵袭能力的改变,应用克隆形成实验和裸鼠皮下致瘤实验检测胃癌细胞增殖能力的改变来确定BM-MSC与GC-MSC表型和功能的差异。通过定量PCR检测比较BM-MSC与GC-MSC中miR-155-5p表达的差异。运用miR-155-5p micmis在GC-MSC中上调miR-155-5p的表达,miR-155-5p inhibitor在BM-MSC中下调miR-155-5p的表达,分析MSC表型、功能的变化,确定miR-155-5p对BM-MSC向GC-MSC转分化的调控作用。采用picTar和TargetScan软件预测和荧光报告素酶基因检测验证并确定miR-155-5p调控的靶基因。采用靶基因干扰片段或抑制剂与miR-155-5p inhibitor共转染BM-MSC,检测其表型和功能的变化,阐明miR-155-5p调控BM-MSC向GC-MSC转分化的分子机制。采用免疫组织化学方法分别检测弥散型、肠型胃癌组织标本和胃炎标本MSC中靶基因的表达,分析靶基因与胃癌分型的关系。从胃癌及癌旁组织中分离培养出GC-MSC与GCN-MSC,Western blot检测靶基因的表达差异。采用靶基因抑制剂或下游效应分子干扰片段处理GC-MSC,检测其表型和功能的改变,阐明miR-155-5p调控的相关信号分子维持GC-MSC的表型和功能的作用及机制。结果:GC-MSC与BM-MSC相比,具有更强的基质细胞活化表型和促进胃癌细胞增殖和转移的能力。miR-155-5p在GC-MSC中低表达,BM-MSC转染miRNA-155-5p inhibitor后可获得GC-MSC样表型和功能,相反,运用miR-155-5p mimics上调GC-MSC中mi RNA-155-5p的表达可削弱其表型和对胃癌细胞的作用。NF-kappa B p65(NF-κB p65)和inhibitor of NF-kappa B kinase subunit epsilon(IKBKE/IKKε)被预测并验证为miR-155-5p的靶基因。使用si-NF-κB p65或si-IKBKE作用于BM-MSC可以抑制miR-155-5p inhibitor对其转分化的调控作用,这种作用也可以被NF-κB p65活化抑制剂PDTC所抑制。IKBKE、NF-κB p65和phospho-NF-κB p65在弥散型胃癌组织MSC中的表达高于肠型胃癌组织MSC,阳性率分别为83.5%、80.8%和65.0%,而它们在胃炎组织MSC中几乎不表达,阳性率仅为19.3%,0%和4%。miR-155-5p在GC-MSC中表达下调,而NF-κB p65表达上调且活化增加,抑制NF-κB p65的活化或其下游关键效应因子的表达可以逆转GC-MSC的表型和功能。结论:GC-MSC较BM-MSC具有更强的促癌表型、功能和低表达miR-155-5p。BM-MSC中miR-155-5p的低表达可上调IKBKE和NF-κB p65的表达并促进NF-κB p65的活化,进而促进其获得GC-MSC样表型和功能,靶向抑制GC-MSC中NF-κB p65的活化或下游效应因子的表达可逆转其促癌表型和功能。为GC-MSC在胃癌微环境中的重塑提供了新的机制,也为胃癌的治疗提供了有效靶点和治疗途径。