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目的:慢性不可预见性应激(CUS)方法建立抑郁模型小鼠,并探讨抑郁症海马结构中锌离子和锌转运体ZnT-1的变化。
方法:
1、实验分组
正常对照组:正常生活饲养42天。
CUS组:每天给予不同刺激,如4℃冰水游泳2min、45℃温水游泳2min、禁食24h、禁水24h、夹尾3min、潮湿垫料24h、180rpm/min水平震荡10min等,共42天。
2、抑郁模型的评判标准糖水偏爱实验和敞箱试验。
3、TSQ荧光探针技术检测海马结构中锌离子的表达情况。
4、免疫荧光化学染色检测海马结构中ZnT-1的表达情况。
5、Western Blot技术检测海马结构中ZnT-1的含量。
结果:
1、糖水偏爱实验第21d时对照组与CUS组的糖水偏爱程度相似,未表现出区别。第43d时,CUS组的糖水偏爱程度低于对照组,具有统计学差异(P<0.05)。
2、旷场试验
CUS组小鼠在前3min移动的方格数和站立次数与正常对照组相比明显减少,存在统计学差异(P<0.01)。CUS组小鼠经过中间区的次数和理毛次数与正常对照组相比明显减少,存在统计学差异(P<0.05)。CUS组小鼠排便粒数较对照组小鼠多,存在统计学差异(P<0.05)。
3、TSQ荧光探针染色CUS组海马结构的锌离子的荧光弱于正常对照组,具有统计学差异(P<0.01)。提示正常对照组小鼠海马结构中的锌离子含量明显多于CUS组小鼠的海马结构。
4、免疫荧光化学染色免疫荧光化学染色结果显示CUS小鼠海马结构中的ZnT-1蛋白的荧光明显弱于正常对照组,CUS组小鼠海马结构中的荧光染色阳性细胞明显少于正常对照组。
5、Western B1ot技术CUS组的ZnT-1蛋白条带均比对照组条带表达减弱。总灰度值与内参比较并进行统计分析,结果表明:CUS组ZnT-1表达量减少(P<0.01)。
结论:
1、抑郁模型小鼠海马结构中的锌离子减少。
2、抑郁模型小鼠海马结构中的ZnT-1蛋白减少。