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目的:骨关节炎(OA)是临床一种常见的多发生于老年人群的关节退行性疾病。人类软骨糖蛋白-39(HC gp-39)作为软骨自身分泌的细胞因子,对骨关节炎软骨细胞增殖与分化的作用如何,目前尚缺乏统一定论。本研究对人体的软骨细胞进行体外培养、分离,观察HC gp-39对关节软骨细胞及祖母细胞增殖的影响。 方法:采用流式分选的方法所得的软骨祖母细胞,进行表型鉴定,流式分选,确定软骨祖细胞(CD105+、CD166+)的百分率后,将细胞接种于96孔板,对其进行扩大传代培养,待细胞充分贴壁后,加入HCgp-39,浓度分别为0,25,50,100,500ng/ml。每种浓度设3个复孔,分别培养24、48、72小时后,收集各个时间点(0h、24h、48h、72h)的细胞,加入10μl的MTS检测液,孵育4小时后二甲亚砜(DMSO)终止反应,酶标仪570nm波长检测各孔光的吸收值(OD值),按公式增殖率=其他时间点OD值÷0小时OD值×100％(同一样品)计算细胞的增值率并进行比较。 结果:关节软骨细胞中能够分离提取表达CD205/CD166的细胞,即软骨祖母细胞;在发生OA的关节软骨细胞中分离提取的软骨祖母细胞细胞增殖速度快于正常组;在正常软骨祖母细胞中加入HC gp-39时,祖母细胞的增殖率随加入的浓度增高而不断降低;而对于OA软骨祖母细胞,加入HC gp-39后,祖母细胞的增殖率明显增高,且具有时间浓度依赖效应。 结论:在成人的关节软骨中存在软骨祖母细胞;发生OA时关节周围的内环境能够刺激软骨祖母细胞的增殖;HC gp-39能够促进关节软骨中软骨祖母细胞的增殖,这可能将为开发基于HC-gp39的用于治疗骨关节炎的药物提供理论依据。