牙龈卟啉单胞菌感染引起孕鼠早产的实验研究

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早产(Preterm Birth,PTB)是指胎龄在37周以下,低出生体重(Low Birth Weight,LBW)是指出生体重不足2500克,早产低出生体重是围产儿患病和死亡的一个主要原因。PTB/LBW是一种有着多种危险因素的多因子综合症,而且会对人体的健康产生长期影响。近年来,大量研究表明,孕妇罹患牙周炎与早产和低出生体重的发生有密切联系,但牙周炎导致PTB/LBW的具体机制目前尚不完全清楚。牙龈卟啉单胞茵(P.gingivalis)是牙周关键致病菌之一,它可以直接侵袭妊娠组织并定植其中,也可以刺激母体或胎儿引起免疫反应而产生炎症因子等通过循环系统到达母胎界面。胎盘是母体与胎儿间进行物质交换的重要器官,对于维持妊娠期间胎儿的正常发育起着至关重要的作用。胎盘组织的炎症和损伤与早产的发生和发展有密切关系。目前牙龈卟啉单胞菌与早产、低出生体重之间的关系以及P.gingivalis导致PTB/LBW的发病机制仍缺乏系统全面的研究。探讨牙龈卟琳单胞菌感染与PTB/LBW发生的可能发病机制,对于预防孕妇的牙周疾病,降低早产低出生体重儿娩出的发生率,提高人口质量和优生优育有十分重要的意义。目的:本课题通过建立孕鼠慢性牙周炎模型和尾静脉注射模型观察牙龈卟啉单胞菌感染对新生仔鼠的出生体重(Birth Weight,BW)、胎龄(Gestational Day,GD)的影响并进一步分析其对孕鼠全身性及局部妊娠组织的作用以探究引起仔鼠早产/低出生体重的相关调控因子。从而为罹患牙周炎孕妇分娩早产低出生体重儿的发病机制提供理论基础,为临床预防和干预早产低体重儿发生提供新思路。方法:两种模型均将Wistar大鼠随机分为3组:Pg感染组、阴性对照组和空白对照组。采用牙周结扎左侧下颌第一磨牙法建立大鼠牙周炎模型,尾静脉穿刺法建立静脉注射模型。记录各组新生仔鼠的出生体重和胎龄。收集各组孕鼠在孕18天的胎盘,以及牙周炎模型中各组的孕18天的羊水以及感染前后不同时间点的血液。采用酶联免疫吸附试验分别检测各组血清和羊水中炎症因子IFN-y、IL-1 β、IL-6的表达水平;采用免疫荧光法检测各组胎盘组织P.gingivaIis的定植情况;采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测各组胎盘组织Fas、FasL、TLR2和TLR4的表达情况。结果:牙周炎模型中:Pg感染组较阴性对照组相比,其新生仔鼠出生体重显著减轻(P<0.01)、胎龄显著减小(P<0.01);孕鼠全身炎症反应时血清中炎症因子白介素(IL)-1β、干扰素(IFN)-γ表达显著升高(P<0.01),而这些细胞因子在孕鼠羊水中的表达无明显变化(P>O.05);孕鼠胎盘组织中发现大量P.gingivaIi 的定植,TLR2(P<0.01)、Fas(P<0.01)、FasL(P<0.01)在胎盘中的表达显著增强,TLR4无明显变化(P>0.05)。静脉注射模型中:Pg感染组较阴性对照组相比,其仔鼠出生体重显著减轻(P<0.001);孕鼠胎盘组织TLR4(P<0.001)、Fas(P<0.001)、FasL(P<0.001)表达显著增强。结论:本研究发现,在慢性牙周炎大鼠模型中,牙龈卟啉单胞菌促使孕鼠血清炎症因子IL-1β和IFN-γ的表达水平升高,还可引起胎盘组织TLR2、Fas、FasL表达增强以及Pgingivalis的定植,从而导致仔鼠早产;而在静脉注射模型中,牙龈卟啉单胞菌感染诱导孕鼠胎盘组织TLR4、Fas、FasL表达增强。两种感染模型均引起新生仔鼠低出生体重。提示孕妇牙周感染导致早产低体重儿,可能与牙龈卟啉单胞菌感染引起的尸gngivalis在胎盘的定植以及P.gingivalis诱导的胎盘组织TLR2、TLR4、Fas、FasL的异常调节以及孕鼠血清炎症因子表达失衡有关。
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