【摘 要】
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目的创建哮喘大鼠的动物模型,通过观察复方过敏煎对哮喘大鼠气道壁厚度、气道壁Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积、TGF-β_1表达的影响,探索复方过敏煎防治哮喘的机制。方法1.造模:哮喘模型建立分为基础致敏和局部激发两部分,大鼠于实验第1天和第8天统一于右下腹腹腔注射10%OVA混悬液1ml(含OVA100mg+氢氧化铝100mg+0.9%生理盐水1ml)完成基础致敏;从实验第15天开始,将各组大鼠分别放置在相同大小
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目的创建哮喘大鼠的动物模型,通过观察复方过敏煎对哮喘大鼠气道壁厚度、气道壁Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积、TGF-β1表达的影响,探索复方过敏煎防治哮喘的机制。方法1.造模:哮喘模型建立分为基础致敏和局部激发两部分,大鼠于实验第1天和第8天统一于右下腹腹腔注射10%OVA混悬液1ml(含OVA100mg+氢氧化铝100mg+0.9%生理盐水1ml)完成基础致敏;从实验第15天开始,将各组大鼠分别放置在相同大小的不完全密封的透明塑料雾化箱中,空白组用0.9%生理盐水进行雾化激发;模型组和各治疗组,第1、2、3、4、5周分别以1%、1.5%、2%、2.5%、3%OVA溶液进行雾化激发诱发哮喘建立哮喘模型。2.实验过程:60只Wistar大鼠按照每组10只,被随机划分为6组,分别是空白组(A组)、哮喘模型组(B组)、西药地塞米松组(C组)、中药复方过敏煎低剂量组(D组)、复方过敏煎中剂量组(E组)、复方过敏煎高剂量组(F组)。实验第15天各组大鼠每次雾化前分别进行灌胃,A组与B组分别利用蒸馏水灌胃,C组用西药地塞米松灌胃、D组进行低剂量复方过敏煎灌胃、E组用中剂量复方过敏煎灌胃、F组进行高剂量复方过敏煎灌胃,每天一次,共进行35天。在每次灌胃操作后,30分钟内对大鼠体征进行观察,同时记录药物对各组大鼠产生的影响。3.检测指标:实验第35天灌胃完成后24小时,对A组到F组中的大鼠进行麻醉,随后将其气管、肺组织进行标本采集,完成苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色相关操作,对各组大鼠气道壁厚度进行检测和对比,免疫组化半定量测定并比较各组间Ⅰ、Ⅲ胶原及TGF-β1表达。结果1.大鼠一般情况:A组大鼠没有出现哮喘现象;B组大鼠出现具有代表性的哮喘症状,例如呼吸短促、烦躁等;C组、D组、E组以及F组中大鼠都出现哮喘症状,但较A组有改善,改善效果最好的两个组分别是C组与E组。2.大鼠肺组织HE染色及测量结果:A组大鼠肺组织并没有出现特殊改变;B组大鼠肺组织气道以及血管等周围有嗜酸性粒细胞(Eosinophils,EOS)存在,与A组比较气道壁显著增厚,(P<0.05,差异有统计学意义);C、D、E、F组大鼠,气道壁厚度相比模型组明显变小,(P<0.05,差异有统计学意义)。3.免疫组化半定量测定Ⅰ、Ⅲ胶原及TGF-β1含量.B组较A组有明显差异,(P<0.05,差异性具有统计学意义);C、D、E、F组与B组相比,Ⅲ胶原及TGF-β1含量要低很多(P<0.05,有统计学意义),但Ⅰ型胶原无明显变化(P>0.05,无统计学意义),即中药复方过敏煎、地塞米松均能减少哮喘大鼠的Ⅲ胶原及TGF-β1含量,但对Ⅰ型胶原作用不大。结论1.复方过敏煎可以不同程度抑制哮喘气道重塑过程中气道壁增厚,抑制Ⅲ型胶原沉积,抑制TGF-β1表达,从而抑制哮喘气道重塑。2在抑制气道壁增厚,抑制Ⅲ型胶原沉积,抑制TGF-β1表达方面,中剂量复方过敏煎与西药地塞米松疗效相同,不良反应较地塞米松更小。3哮喘气道重塑过程中TGF-β1与Ⅲ型胶原含量呈正相关,复方过敏煎和地塞米松可以通过降低TGF-β1来减少Ⅲ型胶原的沉积。
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