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背景与目的:虾青素是天然存在的类胡萝卜素,由于化学结构两端每个芳香环上各有一个羟基和不饱和羰基,使其具有显著的抗氧化能力。氧化应激是机体氧化和抗氧化系统之间的稳态被破坏而造成的应激状态。氧化应激中产生的活性氧(ROS)能诱导自噬产生,而自噬能够缓解氧化应激造成的损伤,从而保护细胞得以存活。本研究拟探讨虾青素通过清除氧化因子调节平滑肌细胞的自噬和凋亡的机制,以及对平滑肌细胞的生物学行为的影响。
方法:1.培养及鉴定人主动脉平滑肌细胞(T/G HA-SMC);2.采用CCK-8、MTT法分析不同浓度虾青素及过氧化氢对传代培养的T/GHA-SMC活力的影响,检测细胞内ROS的量、线粒体膜电位,利用AnnexinV-FITC/PI法检测细胞凋亡,WesternBlot技术检测细胞自噬和凋亡相关蛋白表达差异;3.建立颈总动脉损伤的小鼠模型,给予虾青素灌胃,HE染色检测动脉壁损伤及平滑肌细胞增殖状态。
结果:CCK-8结果显示虾青素对T/GHA-SMC的最佳保护浓度为25μM,过氧化氢半数最大抑制浓度(IC50)为200μM。虾青素处理后,过氧化氢对T/GHA-SMC氧化应激作用减弱,表现为ROS水平降低,线粒体膜电位回升,自噬相关蛋白表达上调,抑制凋亡(P<0.01);虾青素治疗减轻颈动脉损伤小鼠局部血管壁的增生(P<0.01)。
结论:虾青素通过抑制T/GHA-SMCROS的产生,抑制氧化应激反应,从而抑制细胞的自噬作用,减少细胞凋亡,同时对损伤后小鼠血管壁细胞增生有一定的抑制作用。
方法:1.培养及鉴定人主动脉平滑肌细胞(T/G HA-SMC);2.采用CCK-8、MTT法分析不同浓度虾青素及过氧化氢对传代培养的T/GHA-SMC活力的影响,检测细胞内ROS的量、线粒体膜电位,利用AnnexinV-FITC/PI法检测细胞凋亡,WesternBlot技术检测细胞自噬和凋亡相关蛋白表达差异;3.建立颈总动脉损伤的小鼠模型,给予虾青素灌胃,HE染色检测动脉壁损伤及平滑肌细胞增殖状态。
结果:CCK-8结果显示虾青素对T/GHA-SMC的最佳保护浓度为25μM,过氧化氢半数最大抑制浓度(IC50)为200μM。虾青素处理后,过氧化氢对T/GHA-SMC氧化应激作用减弱,表现为ROS水平降低,线粒体膜电位回升,自噬相关蛋白表达上调,抑制凋亡(P<0.01);虾青素治疗减轻颈动脉损伤小鼠局部血管壁的增生(P<0.01)。
结论:虾青素通过抑制T/GHA-SMCROS的产生,抑制氧化应激反应,从而抑制细胞的自噬作用,减少细胞凋亡,同时对损伤后小鼠血管壁细胞增生有一定的抑制作用。