熊果酸联合紫杉醇对胃癌细胞增殖与凋亡的影响及可能存在的机制探讨

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目的探讨中药单体熊果酸(ursolic acid, UA)和化疗药物紫杉醇(paclitaxel,PTX)对人低分化胃腺癌细胞株BGC823增殖及凋亡的调控作用,并初步研究两药通过协同作用抑制胃癌细胞增殖及诱导细胞凋亡的可能机制。方法BGC823细胞常规培养于RPMI-1640培养液中,细胞长至亚单层后添加不同浓度的UA和(或)PTX,连续培养24h、48h和72h。MTT法检查细胞增殖凋亡,CI指数法判定两种药物之间相互作用,光镜下观测细胞形态学变化及DAPI染色法观察细胞凋亡的形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Westernblot检测增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA)、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果UA、PTX呈浓度和时间依赖性抑制BGC823细胞增殖,联合用药组的细胞增殖抑制率显著性大于两药单用组(P<0.01);光镜下细胞形态皱缩变圆,边缘不清呈死亡征象,DAPI染色显示BGC823发生了典型的细胞凋亡形态学改变,UA组、PTX组和联合用药组的细胞凋亡率分别为(30.2±1.7)%、(31.0±4.0)%和(55.6±3.1)%,显著高于对照组的(7.6±0.9)%(P<0.01),联合用药组的细胞凋亡率显著高于单一用药组(P<0.05)。流式细胞仪所示联合组的凋亡率显著高于对照组及单一用药组;UA联合PTX显著下调PCNA、Bcl-2而上调Bax表达(P<0.05)。结论:UA、PTX抑制BGC823细胞增殖,通过下调Bcl-2而上调Bax表达诱导细胞凋亡,且两者联合在抗癌作用具有协同效应。
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