目的观察生、制何首乌不同溶剂提取物对斑马鱼幼鱼肝脏的影响,探索何首乌中主要的18种成分的肝毒性作用,研究何首乌的肝毒性物质基础,同时探讨其肝毒性作用机制。方法首先,用不同溶剂(水,50%乙醇)分别提取生、制何首乌,对肝脏荧光转基因斑马鱼连续给药72h。其次,分别对斑马鱼给以何首乌18种成分初步筛选何首乌的肝毒性成分。然后,分别测定给药后斑马鱼体ALT、AST、GSH的活力和TBIL的含量,同时分别对其进行肝脏切片分析,观察斑马鱼肝脏组织病理学改变,进一步筛选何首乌的肝毒性成分。接着,选取NF-κB炎症信号通路和P53凋亡信号通路中的各个靶点作为研究对象,将蛋白靶点分别与配体和药物分子进行分子对接。继而,通过qPCR方法检测NF-κB炎症信号通路和P53凋亡信号通路中目的基因mRNA的表达量,同时通过Western blot方法检测目标蛋白的表达量,最后,通过苏丹黑B染色和TUNEL染色,显微镜观察各组斑马鱼的染色情况并拍照。结果何首乌对斑马鱼幼鱼肝脏具有一定毒性,同时,何首乌中所含的芦荟大黄素能降低斑马鱼的肝脏面积和肝脏荧光强度。芦荟大黄素能显著降低斑马鱼体内ALT、AST、GSH的活力以及升高TBIL的含量,且其斑马鱼肝组织均出现大片片状坏死,肝组织细胞发生明显形态改变,肝细胞排列不规则等。其中,分子对接结果表明,芦荟大黄素能与NF-κB炎症信号通路以及P53细胞凋亡信号通路上的各个靶点成功对接。在mRNA表达水平上,芦荟大黄素能显著增加NF-κB信号通路和P53凋亡信号通路中所有靶点基因的mRNA表达水平。在蛋白表达水平上,芦荟大黄素能显著增加P65,JNK和P53的蛋白表达。芦荟大黄素能使斑马鱼肝脏以及卵黄囊部位出现炎性细胞浸润,同时明显增加斑马鱼肝脏部位及卵黄囊部的凋亡信号。结论何首乌对斑马鱼幼鱼肝脏具有一定毒性作用,其肝毒性作用主要是由蒽醌类化合物介导,其肝毒性物质基础主要是芦荟大黄素,其肝毒性作用机制是通过激活NF-κB炎症信号通路和P53凋亡信号通路,使肝脏部位产生炎症,导致肝细胞凋亡。