长链非编码RNA-01133在子宫内膜癌中的表达及功能研究

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目的:子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)是最常见的妇科恶性肿瘤之一,严重威胁着妇女健康。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)被发现可以通过多种机制影响肿瘤的发生和发展,目前已成为肿瘤发生机制及治疗靶点的研究热点,其中包括子宫内膜癌。本研究前期通过分析GEO数据库发现linc01133在EC中表达较高,然而linc01133在EC组织中的表达情况以及对EC发病机制的影响尚不知晓。在本研究中检测linc01133在EC组织中的表达情况以及对EC细胞增殖、侵袭和迁移的影响,为探讨EC的发病机制以及寻找新的诊疗靶点提供一定的理论基础。方法:1.组织实验:q RT-PCR方法检测子宫内膜癌组织、癌旁组织以及正常子宫内膜组织中linc01133的表达情况。2.细胞实验:(1)选用Ishikawa(ER+)和HEC-1A(ER-)两种子宫内膜癌细胞系。通过用si RNA-01133转染细胞的方式下调细胞中linc01133的表达。CCK-8方法检测下调linc01133表达后的Ishikawa和HEC-1A细胞增殖能力变化情况。(2)流式细胞术检测下调linc01133表达后的Ishikawa和HEC-1A细胞周期和细胞凋亡情况。(3)Transwell侵袭实验和划痕实验分别检测下调linc01133表达后Ishikawa和HEC-1A细胞侵袭和迁移能力改变。结果:1.组织q RT-PCR结果显示:与正常子宫内膜组织相比,肿瘤组织及癌旁组织中linc01133的表达显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05),而肿瘤组织和癌旁组织中linc01133的表达差异无统计学意义(P>0.05)。2.下调linc01133表达后对Ishikawa和HEC-1A细胞增殖、细胞周期和凋亡、细胞侵袭和迁移的影响。(1)CCK-8结果显示:与空白对照组和阴性对照组相比,下调linc01133的表达可以显著减弱Ishikawa和HEC-1A细胞的增殖能力,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)流式细胞术结果显示:细胞周期:与空白对照组和阴性对照组的G1期比例相比,转染si RNA-01133后Ishikawa和HEC-1A细胞在G1期比例增加,发生细胞周期阻滞,差异具有统计学意义(P<0.001)。细胞凋亡:与空白对照组和阴性对照组相比,下调linc01133表达后增加Ishikawa和HEC-1A细胞凋亡率,促进细胞发生凋亡,差异具有统计学意义(P<0.001)。(3)Transwell结果显示:与空白对照组和阴性对照组相比,下调linc01133的表达可以显著减少Ishikawa和HEC-1A穿过上室细胞数目,差异具有统计学意义(P<0.001),这说明linc01133的表达降低减弱肿瘤细胞的侵袭能力。划痕实验结果显示:与空白对照组和阴性对照组相比,下调linc01133的表达可以显著降低Ishikawa和HEC-1A细胞迁移率,差异具有统计学意义(P<0.05),这说明linc01133的表达降低减弱肿瘤细胞的迁移能力。结论:研究表明linc01133在子宫内膜癌组织及癌旁组织中表达均升高,降低子宫内膜癌细胞中linc01133的表达后肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力均减弱,细胞凋亡增加,并发生G1期阻滞,证明了linc01133可以促进子宫内膜癌细胞发生增殖、侵袭和迁移,抑制细胞凋亡,从而发挥致癌作用。
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