【摘 要】
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樱桃根癌病、茎腐病和褐腐病是樱桃生产种植中常见的三种病害,其致病菌分别为根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）、烟草疫霉（Phytophthora nicotianae）和核果链核盘菌（Monilinia laxa）。生物防治具有绿色环保、防效稳定、持效期长等优点,对樱桃病害的综合防治至关重要。为得到对樱桃根癌病、茎腐病和褐腐病具有明显拮抗作用的生防菌,本研究从山东省烟台
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樱桃根癌病、茎腐病和褐腐病是樱桃生产种植中常见的三种病害,其致病菌分别为根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）、烟草疫霉（Phytophthora nicotianae）和核果链核盘菌（Monilinia laxa）。生物防治具有绿色环保、防效稳定、持效期长等优点,对樱桃病害的综合防治至关重要。为得到对樱桃根癌病、茎腐病和褐腐病具有明显拮抗作用的生防菌,本研究从山东省烟台市农业科学院樱桃园采集健康樱桃植株的根际土,分离、筛选对樱桃根癌病、茎腐病和褐腐病均具有抑菌效果的生防菌株,并初步探索其复合菌剂配置、生防效果及抑菌分子机理,具体研究结果如下。1.通过平板稀释实验,从患病樱桃植株的根瘤组织中分离得到樱桃根癌病的致病菌根癌农杆菌（A.tumefaciens）,作为接下来筛选防治樱桃根癌病生防菌的靶标菌。2.通过室内分离筛选实验,从健康樱桃植株的根际土壤中分离得到对樱桃根癌病、樱桃茎腐病和樱桃褐腐病的致病菌均具有良好抑制效果的生防菌YTL-7和YTQ-3。经过形态学、生理生化特征和分子生物学鉴定,确认生防菌YTL-7和YTQ-3分别为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）和贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）。3.初步构建复合菌剂。发现当接种比例为2:3（YTL-7:YTQ-3）时复合菌液对樱桃根癌病、樱桃茎腐病和樱桃褐腐病的致病菌的抑制效果最佳。4.菌株YTL-7和YTQ-3的无菌滤液经过高温处理后仍可保持抑菌效果,并且对多种苹果和葡萄病害的致病菌具有显著抑制效果,说明菌株YTL-7和YTQ-3可以分泌抗菌活性物质,且具有广谱的抑菌性和稳定性,满足一般生产条件。5.通过盆栽实验,分析初步构建的复合菌液对樱桃幼苗及其土壤微生物的影响。发现按最优接种比例2:3（YTL-7:YTQ-3）配置的复合菌液和菌株YTL-7发酵的单一菌液均可以提高樱桃幼苗相关抗性酶活性,促进樱桃幼苗生长,且复合菌液的效果优于单一菌液。菌株YTL-7和YTQ-3的菌液未对樱桃幼苗土壤细菌的多样性造成显著影响,但可以增加樱桃土壤中有益细菌链霉菌属、溶杆菌属和假单胞菌属的丰度,减少被病害侵染的樱桃土壤中的真菌数量。6.通过全基因组测序预测菌株YTL-7、YTQ-3均可以分泌的抗菌活性物质有大环内酯（macrolactin）、杆菌烯（bacillaene）、艰难菌素（difficidin）、丰枯草菌素（fengycin）、铁载体（bacillibactin）、表面活性素（surfactin）和恶唑类型细菌素（plantazolicin）、亲水性抗菌二肽（bacilysin）。此外,预测菌株YTQ-3可以比YTL-7多分泌一种抗菌活性物质,即新环脂肽抗生素罗克霉素（locillomycin）。这些物质均具有广谱的抗真菌或细菌活性,保护植物免受多种病原体的侵害。
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