MNSFβ是本实验室新发现的一个着床相关因子,它是一种由抑制性T细胞合成的具有非特异性免疫抑制作用的淋巴因子,推测其可能与母胎间免疫耐受的形成有关。本课题主要研究MNSFβ的功能及其在胚胎着床中的作用,以进一步揭示胚胎着床的分子机制,从而为不孕、不育机制的研究、提高人工辅助生育技术以及开发研制抗着床避孕药物提供理论基础；并从中寻找潜在的可实现生育调控目的的新环节或新的靶分子。本课题主要结果如下：1.由于抗MNSFβ抗体尚未市场化,本课题首先制备抗MNSFβ多克隆抗体,通过ELISA证实抗体效价为1：125000,并将之作为本研究的实验工具之一。2.应用免疫组化,RT-PCR及Western blot技术证实MNSFβ表达于小鼠全身各组织脏器；在小鼠胚胎着床前、后及妊娠期间MNSFβ在子宫组织中的表达具有动态性变化,即在怀孕4.5天的子宫中表达减少,之后随怀孕时间的延长,表达逐渐增加,但到怀孕8.5天时,非着床位点的表达高于着床位点组织。3.分离小鼠子宫内膜细胞,通过免疫荧光证实为基质细胞,并且该细胞和囊胚均表达MNSFβ基因；将小鼠子宫内膜基质细胞与孕4.5天的囊胚进行共培养,证实囊胚可向基质细胞侵袭,粘附,铺展,最终与其融合,类似着床过程；用MNSFβ抗血清可明显抑制小鼠囊胚向子宫内膜基质细胞的铺展与粘附生长,并可诱导胚胎死亡,且呈剂量反应关系。4.选用人子宫颈鳞癌细胞系(HCC-94)转染MNSFP表达或siRNA,用其上清刺激小鼠淋巴细胞,证实过表达MNSFβ可促进淋巴细胞分泌IL-4,但抑制TNFα的分泌；与之相反,沉默或用抗体中和MNSFβ则抑制IL-4的分泌,却促进TNFα的分泌,提示MNSFβ可能参与母胎免疫耐受。5.建立MNSFβ条件性基因剔除小鼠,与Cre小鼠交配,获得杂合型MNSFβ基因敲除小鼠。交配实验证实MNSFβ部分基因缺陷导致小鼠生育能力明显下降,且仅雌鼠受影响；子代雌雄比例失调,并不能得到纯合型小鼠。6.通过免疫组化、Real-time PCR及WB证实杂合型小鼠子宫组织的MNSFβmRNA与野生型小鼠相比,无明显改变,但其蛋白表达却明显减少；此外,杂合型小鼠子宫腺上皮组织变得疏松,子宫腔腔隙也明显加宽。7.选择胚胎着床与妊娠的不同时间点(即孕4、5、8、11和14天)观察子宫中的胚胎数量和发育情况,结果证实在胚胎着床和胚胎发育早期子宫中的胚胎数量正常,但在发育中期(孕11和14天)胚胎出现明显异常,即失去胎鼠的形态,并固缩成团块状。提示MNSFβ参与胚胎发育。上述研究结果提示MNSFβ在小鼠胚胎着床过程中是必需的,且与免疫抑制相关。而该基因部分缺陷或表达减少,在体内外均可引起胚胎着床及发育障碍。因此,MNSFβ有可能成为发展新型抗生育技术的潜在靶分子。