本研究是基于我们科研团队三项国家自然科学基金项目、二十余年临床实践及科研验证而总结提出的“依据单一症状的中医不寐五神分型病位诊断法”（简称“中医不寐五神分型”,包括心不藏神不寐、肝不藏魂不寐、肺不藏魄不寐、脾不藏意不寐、肾不藏志不寐5型）,选择其中之“心不藏神不寐”一型而进行的专项研究,涉及“心不藏神不寐”的理论研究、“心不藏神不寐”动物模型的构建及“心不藏神不寐”动物模型的药物干预研究三个部分。第一部分心藏神对寐寤具有重要的调节作用,心不藏神不寐的本质在于心神不安于舍,以入寐唯艰、迟寐、甚或彻夜不眠为主症,病位主要与心有关。心不藏神不寐的病因包括虚实两个方面,邪实多因心火、痰火、食滞和瘀血等,正虚多责之于心之气、血、阴、阳亏虚等;其病机主要是邪扰心神或心神失养。心不藏神不寐的治则有祛邪安心神（清心火安心神、祛痰热安心神、和胃气安心神、化瘀血安心神）、补益安心神（补心气安心神、养心血安心神、滋心阴安心神、温心阳安心神）和重镇安心神。临床多从心火亢盛、痰火扰心、心胃不和、瘀血阻心、心气亏虚、心血亏虚、心阴不足和心阳亏虚等方面进行辨治。治疗心不藏神不寐的安心神归经药物较多,然而每味药物又有其自身的特点,临床上可根据心不藏神不寐病机偏于心火盛、痰热、瘀血或心之气、血、津液不足等病理因素,在遣方用药时,有针对性的加入不同性能的安心神归经药物,从而有助于疗效的提高。文献报道心火亢盛是不寐病的常见病机,而黄连是清心火安心神诸药中最擅长治疗失眠的一味,古今文献报道较多;其发挥安心神作用的主要成分是小檗碱,而其它清心火安心神药则不含有这一成分;且火热之邪扰神为心不藏神不寐的常见致病因素,黄连清心火、安心神之功恰好针对火热之邪扰神这一致病因素。因此,本研究首选黄连进行心不藏神不寐的实验研究。第二部分目的:探索心不藏神不寐大鼠模型的造模方法和评价指标。方法:采用对氯苯丙氨酸联合咖啡因复制心不藏神不寐大鼠模型,并从一般情况、水迷宫实验、戊巴比妥钠致眠实验、心血管相关因子和脑电图等方面对模型进行评价。结果:与正常组比较,复合组大鼠体重明显减轻,心率、呼吸频率、收缩压明显升高。与正常组比较,复合组睡眠潜伏时间明显延长（P<0.01）,高于PCPA组、咖啡因组（P<0.01）;复合组睡眠持续时间明显缩短（P<0.01）,低于PCPA组、咖啡因组（P<0.01）。与正常组比较,复合组、PCPA组大鼠逃逸潜伏期明显延长（P<0.01）,复合组、PCPA组大鼠目标象限穿台次数均减少（P<0.01）。与正常组比较,复合组大鼠血浆、心肌及脑组织中ANP、BNP、ET-1、IL-6、TNF-α及LI-17A含量均有不同程度的升高,且高于PCPA组、咖啡因组。结论:PCPA联合咖啡因的造模方式可导致大鼠学习记忆能力下降,心血管功能异常,脑电特征出现TST明显减少,睡眠潜伏期明显延长,SWS明显减少,REMS减少,此与心不藏神不寐患者PSG特征类似,故以PCPA联合咖啡因可以构建心不藏神不寐大鼠模型。第三部分目的:基于转录组测序技术探索安心神归经药黄连的单体黄连素治疗心不藏神不寐的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分成正常组、模型组、地西泮组和黄连素低、中、高剂量组,每组10只。黄连素高、中、低剂量组分别灌胃给予黄连素200、100、50mg/kg;地西泮组给予0.92mg/kg地西泮水溶液灌胃;模型组和正常组灌胃给予同体积的生理盐水,连续灌胃给药7天,治疗结束后行戊巴比妥钠睡眠实验及水迷宫实验,并采用Elisa法检测血浆中ANP、BNP、ET-1、IL-6、TNF-α及IL-17A的含量。同时选取正常组、模型组、黄连素中剂量组和地西泮组大鼠海马组织进行转录组测序,按padj<0.05及|log2foldchange|≧2作为显著差异表达基因的筛选条件（其中log2foldchange≧2为显著上调基因,log2foldchange≦-2为显著下调基因）;以padj<0.05作为GO、KEGG显著富集的筛选标准。采用PCR、Western blot对关键基因进行验证。结果:与模型组比较,黄连素低、中、高剂量组及地西泮组大鼠睡眠潜伏时间均缩短、睡眠持续时间均延长（P<0.01）,大鼠逃逸潜伏期均明显缩短、穿台次数均增加（P<0.01）。与模型组比较,黄连素低、中、高剂量组及地西泮组均能降低血浆中ANP、BNP、ET-1、IL-6、TNF-α及IL-17A的含量,且黄连素中剂量组优于地西泮组（P<0.01）。与模型组比较,正常组筛选出显著差异表达基因164个,其中上调146个,下调18个;黄连素中剂量组筛选出显著差异表达基因164个,其中上调159个,下调5个;地西泮组筛选出显著差异表达基因123个,其中上调111个,下调12个。根据padj<0.05,并与模型组比较,正常组富集到显著上、下调GO条目分别为564个（BP 384个、CC 89个、MF 91个）和320个（BP 150个、CC 107个、MF 63个）;黄连素中剂量组,富集到显著上、下调GO条目分别为558个（BP 398个、CC 87个、MF 73个）和343个（BP 148个、CC 130个、MF 65个）;地西泮组富集到显著上、下调GO条目分别为830个（BP619个、CC 109个、MF 102个）和243个（BP 110个、CC 82个、MF 51个）。根据padj<0.05,并与模型组比较,正常组富集显著上、下调KEGG通路分别为84个和13个;黄连素中剂量组富集显著上、下调KEGG通路分别为88个和15个;地西泮组,富集显著上、下调KEGG通路分别为89个和14个。与正常组比较,模型组关键基因Ar、Erb B2、Erb B4和Grin2a表达量明显降低,经黄连素中剂量、地西泮治疗后Ar、Erb B2、Erb B4和Grin2a表达量明显升高,差异具有统计学意义（P<0.01）。结论:安心神归经药黄连的单体黄连素治疗心不藏神不寐主要是通过上调相关基因实现的,其发挥作用的通路比较多,且上调通路多于下调通路。安心神归经药黄连的单体黄连素可促进心不藏神不寐大鼠海马中Ar、Erb B4、Erb B2、Grin2a基因的表达,并激活Erb B信号通路,这可能是其安心神作用的潜在有效靶点及通路。