三氟拉嗪（Trifluoperazine,TFP）多用于细胞信号和神经学方面的研究,因其能与钙调蛋白结合而被广泛地用作钙调蛋白的阻断剂,进而可以观察下游钙调蛋白依赖蛋白的活性变化。TFP在医疗上是成熟的治疗精神疾病的药物,最大的优点是对心血管伤害小。中心蛋白有着与钙调蛋白相类似的结构,都含有四个EF手结构域,能够与四个Ca²⁺进行配位,结合后蛋白构象由闭合状态转变为开放状态,疏水区暴露,易于与其他信号蛋白结合。中心蛋白在细胞生命周期中起着极其重要的作用,涉及到细胞分裂、运动、维持正常生理活性的方方面面,最为重要的是中心蛋白在核苷酸切除修复过程中起着无可替代的作用。鉴于中心蛋白与钙调蛋白的相似性,本文选取八肋游仆虫中心蛋白（Euplotes octocarinatus centrin,WT-EoCen）作为研究对象,深入了解TFP与中心蛋白的结合及对中心蛋白功能的影响,希望能够为后续疾病防控提供理论基础。首先,应用荧光光谱、紫外可见吸收光谱等手段研究了TFP的相关性质。结果表明,溶剂极性、温度、pH均对TFP的光谱性质有明显的影响,而盐浓度对TFP的光谱性质几乎没有影响;TFP浓度影响其共振光散射谱。图谱的变化意味着TFP结构形态的变化,即不同实验条件TFP会以不同形态存在,为减少副产物的产生,在实验过程中要严格控制反应条件。接下来使用荧光光谱、等温滴定量热法、圆二色谱、共振光散射等方法对TFP与八肋游仆虫中心蛋白N端半分子（apoN-EoCen）和八肋游仆虫中心蛋白C端半分子（apoC-EoCen）的相互作用进行了研究。结果表明,在pH=7.4,10 mmol/L Hepes缓冲液中,TFP能够与apoN-EoCen以1:1的比例结合,与apoC-EoCen以2:1的比例结合,条件结合常数分别为10³ L/mol和10⁷ L²/mol²,结合后均能够导致半分子蛋白α螺旋含量降低,同时对蛋白的聚集功能、核苷酸切除修复功能、Tb³⁺敏化荧光产生抑制作用。这是由于TFP的结合引起蛋白构象的改变,导致其功能的抑制或丧失。最后,使用荧光光谱、等温滴定量热分析、红外光谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳等技术对TFP与WT-EoCen的相互作用进行研究。结果表明TFP与WT-EoCen以3:1的结合比结合,条件结合常数为10¹² L³/mol³;TFP结合WT-EoCen后导致蛋白α螺旋含量降低,进而使WT-EoCen功能受到抑制,比如聚集功能、核苷酸切除修复功能、与靶肽的结合功能及对Tb³⁺敏化荧光都被抑制。TFP对WT-EoCen产生的影响和对半分子产生的影响相似,但通过对比发现,WT-EoCen的N端结构域与C端结构域之间存在微弱的协同效应,协同效应能够促进TFP与WT-EoCen的结合,同时对WT-EoCen的二级结构影响更大,但对WT-EoCen的聚集和敏化功能抑制效果并没有增强。