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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL)是继TNF、FasL之后发现的肿瘤坏死因子超家族新成员，具有选择性地诱导癌化或转化的细胞发生凋亡，对正常细胞及人体组织安全无毒，同时，TRAIL可以不依赖p53。因此，TRAIL受到了国内外学者的广泛重视，有望成为新的抗肿瘤药物。 然而，目前，TRAIL对宫颈癌的作用机理并不十分清楚，仅停留于对某一种或某几种蛋白质的功能研究，难以在特定的时间和特定的空间整体地、系统地、透彻地阐释TRAIL的作用机制。本研究以HPV18阳性的宫颈癌细胞系HeLa为模型，通过原核表达系统表达的TRAIL蛋白，开展了TRAIL蛋白的生物学活性，作用靶位及作用机理的初步研究，总的结果是为TRAIL的作用靶点及作用机理提供新的理论依据。 我们的研究分四个部分进行。 第一部分 人可溶性TRAIL cDNA的克隆及原核表达系统的构建 利用基因工程技术克隆人可溶性TRAIL胞外区114～281片段的cDNA及构建其原核表达载体pET28c(+)-sTRAIL。将pET28c(+)-sTRAIL转化大肠杆菌BL21(DE3)，经氨苄西林筛选，建立原核表达系统pET28c(+)-sTRAIL/BL21(DE3)，该系统经用1.0mmol／LIPTG诱导4h，得获了TRAIL融合蛋白，纯化并鉴定，表明，其分子量约为19.8kD。 第二部分 TRAIL对HeLa生物活性的研究 用TRAIL蛋白干预HeLa，经过MTT法检测细胞存活分数；AO／EB