【摘 要】
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目的： 1．探讨以重组腺相关病毒(rAAV)介导shRNA-LMP-1干扰的可行性及对目的基因表达抑制的效率。 2．研究EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP-1)在体内对鼻咽癌(NPC)细胞生长及转移中的
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目的： 1．探讨以重组腺相关病毒(rAAV)介导shRNA-LMP-1干扰的可行性及对目的基因表达抑制的效率。 2．研究EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP-1)在体内对鼻咽癌(NPC)细胞生长及转移中的作用。 3．探讨rAAV介导shRNA-LMP-1干扰在鼻咽癌基因治疗中的意义。 方法： 利用已经成功设计针对LMP-1的发夹状RNA(shRNA)序列，采用重组腺相关病毒做为载体，介导RNA干扰(RNAi)序列特异性抑制LMP-1基因表达，PT-PCR鉴定抑制效率，流式细胞仪及MTT检测LMP-1基因表达抑制后对鼻咽癌细胞C666-1增殖及细胞周期的影响，同时通过观察鼻咽癌细胞C666-1的移动能力及基底膜穿透能力的变化，分析LMP-1基因沉默在细胞水平对鼻咽癌细胞周期、增殖及转移能力的影响。 将体外转染RNA干扰后的EB病毒阳性鼻咽癌细胞(C666-1)注入裸鼠肝脏包膜下制作鼻咽癌异位肝种植的肝肺转移模型，观察肝脏成瘤及肝内、肺转移情况，并以免疫组化检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达，分析LMP-1基因沉默在动物水平对鼻咽癌细胞成瘤及转移能力的影响及机制。
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