论文部分内容阅读
目的：观察止颤汤对体外培养及移植入帕金森病大鼠脑内的多巴安神经元存活及增殖的作用。
方法：1.体外培养的NSC分为四组：中药组加入有止颤汤含药血清的培养基，阳性对照组给IL-1α(0.1ug/L)、IL-11(1ug/L)、LIF(1ug/L)、GDNF(10ug/L)培养基，正常对照组给一般培养基，空白对照组给不含药血清的培养基；14天后免疫组化检测多巴胺(DA)能神经元标志物酪氨酸羟化酶(TH)蛋白、Rt-PCR法检测TH和DAT mRNA表达，Rt-PCR法检测NSC分化相关因子Ptx3、Nurr1、Shh等mRNA的表达。2.体外诱导神经干细胞分化为DA神经元并用GFP标记，实验动物分为四组，正常组及模型组用生理盐水灌胃，同时脑内移植普通培养基，对照组脑内移植多巴胺能神经元，生理盐水灌胃，中药组脑内移植多巴胺能神经元，用止颤汤灌胃。分别在处理后7天、14天、28天处死大鼠，观察动物行为学评分，比较各组GFP数量，同时免疫组化法检测DAT蛋白表达。
结果：1.体外培养中荧光显微镜下观察各组神经元标志物TH蛋白表达，阳性对照组表达较多，空白组有少量表达，止颤汤组及正常对照组无表达。可能与血清有促进神经干细胞多向分化的作用有关；在各组分化相关因子Shh、Ptx3、Nurr1基因表达比较中，止颤汤组较正常组及空白对照组有显著差异。2.在止颤汤对体外分化的DA神经元移植后存活的促进作用的观察上，和其他对照组比较，中药组对DA移植后PD大鼠的行为学评分有显著改善；中药组GFP、DAT蛋白表达有所增加，但并不显著。
结论：中药止颤汤对移植入帕金森病大鼠脑内的多巴胺能神经元存活及增殖有一定促进作用，但尚不够显著。对微环境中神经干细胞分化部分相关因子的表达有显著影响。