幽门螺杆菌感染对慢性胃炎中医证候及舌苔代谢组学的影响

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目的:调查分析幽门螺杆菌感染对慢性胃炎患者中医证候及舌苔分布的影响,筛选慢性胃炎幽门螺杆菌感染患者舌苔中的特异性代谢物,探讨慢性胃炎幽门螺杆菌感染形成的生物学基础。  方法:(1)采用流行病学的调查方法,制作量表收集患者的相关资料,分析幽门螺杆菌感染对慢性胃炎患者中医证候及舌苔分布的影响。(2)舌苔样本的形态学研究:采用巴氏染色法对慢性胃炎Hp阳性患者与Hp阴性患者的舌苔脱落细胞进行染色。(3)舌苔代谢组学研究:采集到慢性胃炎Hp阳性与Hp阴性患者舌苔样本。对所有舌苔样本进行硅烷化衍生反应处理,并采用GC-MS进行代谢组学检测,获取各样本的总离子流图。然后,对数据进行提取、去噪音、归一化等一系列预处理,通过主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)、正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)等统计学分析方法筛选组间差异性代谢峰,利用NIST数据库定性差异代谢标志物并从KEGG数据库中查询相关的代谢途径及代谢基因。  结果:(1)Hp相关性慢性胃炎患者证候分布:在收集到的412例慢性胃炎患者中,Hp阳性患者有321例,Hp阴性患者有91例,Hp感染率77.91%。慢性胃炎患者证候分布由高到低依次为脾胃湿热30.34%,脾胃气虚29.37%,湿浊中阻16.26%,肝胃不和8.73%,肝胃郁热8.50%,胃阴虚4.37%,胃络瘀血2.67%。Hp阳性组慢性胃炎患者证候分布由高到低依次为脾胃湿热33.02%,脾胃气虚24.9%,湿浊中阻16.51%,肝胃不和9.97%,肝胃郁热9.65%,胃阴虚3.42%,胃络瘀血2.80%。提示脾胃湿热证是Hp阳性慢性胃炎患者最常见的证候。(2)Hp感染对慢性胃炎患者舌苔的影响:慢性胃炎患者舌苔分布由高到低依次为黄腻苔34.47%,白腻苔22.57%,薄白苔19.90%,薄黄苔9.71%,黄白兼夹苔7.28%,剥落苔6.07%。Hp阳性组慢性胃炎患者舌苔分布由高到低依次为黄腻苔37.69%,白腻苔23.99%,薄白苔15.26%,薄黄9.70%,黄白兼夹8.41%,剥落苔4.98%,提示黄腻苔是Hp阳性组慢性胃炎患者最常见的舌苔。(3)Hp感染对慢性胃炎胃黏膜病理变化的作用:慢性胃炎患者Hp阳性组萎缩率30.91%,Hp阴性组萎缩率14.08%,慢性胃炎患者Hp阳性组肠化率为32.00%,Hp阴性组萎缩率12.68%,经卡方检验Hp阳性组萎缩率及肠化率要显著高于Hp阴性组。(4)舌苔形态学研究结果:Hp阳性组与Hp阴性组舌苔脱落细胞巴氏染色存在差异。(5)舌苔代谢组研究结果:慢性胃炎Hp阳性组与Hp阴性组的舌苔差异峰有4个,经查询,这些代谢物为乙烯、先锋霉素Ⅱ、γ-氨基丁酸、焦谷氨酸。KEGG pathway中差异代谢基因有:PepN、Trys、TcTrys、TcTryR。  结论:(1)Hp感染性慢性胃炎患者最常见的证候是脾胃湿热证,最常见的舌苔是黄腻苔。(2)Hp阳性组慢性胃炎患者萎缩、肠化发生率显著高于Hp阴性组。(3)舌苔代谢组学实验结果显示Hp阳性组与Hp阴性组舌苔代谢物存在差异,差异代谢物我们找到了其中4个,分别为乙烯、先锋霉素Ⅱ、γ-氨基丁酸、焦谷氨酸。差异代谢基因有:PepN、Trys、TcTrys、TcTryR。这些差异代谢物多与氨基酸的合成与分解相关,提示氨基酸的代谢途径可能是慢性胃炎Hp感染形成机制之一。
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