发酵谷物中产赖氨酸益生菌的筛选及其应用

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发酵谷物食品通常是指利用微生物作用而制得的具有民族特色的食品。发酵谷物食品不仅具有基本的营养功能,还具有大量的益生菌。益生菌是由一种或多种有益微生物及代谢产物组成,可供人类或动物直接使用和喂食的活菌制剂。它可改善动物肠道菌群的平衡,降低肠道内有害物质,增强动物机体免疫能力,促进动物生长发育,提高动物生产性能。益生菌无残留、不产生耐药性,是动物的绿色饲料添加剂。赖氨酸是动物体内第一限制性必需氨基酸,是畜禽合成动物蛋白必需的最重要的氨基酸之一。益生菌产生的赖氨酸是绿色、无毒、无污染、安全可靠且可以直接添加的饲料赖氨酸。目前,我国奶牛平均单产奶水平仅为2 800~3 000kg/年,而国外奶牛平均单产则达到了7 000kg/年。产奶量的高低除奶牛的品种、饲养的环境、饲喂的饲料这些因素外,饲料中赖氨酸、蛋氨酸等必需氨基酸不足也是很关键的因素。功能益生菌研究刚刚开展,益生菌中筛选产赖氨酸菌种方面的研究也还比较少,本实验旨在从发酵谷物中筛选出几种产赖氨酸较高的益生菌。本实验对从面包、麻花、馒头、发面饼、等发酵谷物的生面团及米酒、白酒曲中分离出的菌株进行培养、发酵,利用高效液相色谱技术检测其发酵液中赖氨酸的含量,筛选出富含赖氨酸的菌株,并利用16S rDNA分析及blast分析、特异性引物PCR等技术对所选产赖氨酸含量较高的菌株进行鉴定,最后将所得的菌株发酵液作为饲料添加剂应用到奶牛的饲喂当中,观察其对奶牛生产性能的影响。本实验所得的研究结果如下:通过划板分离培养、镜检等常规方法和高效液相色谱技术分离、培养、筛选出产赖氨酸较高的益生菌菌种2株。利用16S rDNA分析及blast分析、特异性引物PCR等技术鉴定出这2株菌为肠膜明串株菌ATCC 8293、德氏乳杆菌ATCC BAA-365,其发酵液中赖氨酸含量分别为52.33g/L、46.09 g/L。将肠膜明串珠菌发酵液应用于奶牛饲料中,可使奶牛奶产量提高12.03%,奶中乳蛋白质量分数提高1.76%,乳糖质量分数提高1.23%,干物质质量分数提高0.76%,差异均极显著(P<0.01)。对乳脂率无影响。本实验成功的筛选出了产赖氨酸较高的益生菌菌种,并且动物试验结果显示,产赖氨酸较高的益生菌菌种有可能作为饲料添加剂用于奶牛奶产量和质量的提高。
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