用CD-DST检测头颈肿瘤细胞对化疗药物敏感性的应用研究

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目的:在大量化疗药物敏感度的检测方法中,CD-DST作为一种优秀的检测手段,其在头颈部恶性肿瘤化疗中的应用价值,值得进一步探讨。我们分别将原代培养的肿瘤细胞,鼻咽癌亲本细胞株CNE-1以及相对应的鼻咽癌紫杉醇耐药细胞株CNE-1/taxol收集后行CD-DST法,以检测肿瘤个体对不同单种化疗药物(多西他赛、紫杉醇、顺铂、5-氟尿嘧啶)的敏感性并进行相关比较研究。方法:1.收集中南大学附属湘雅三医院2013年10月至2014年02月头颈肿瘤手术标本46例,对标本进行处理后,转入胶原凝胶包被的培养瓶中行原代培养。2.回收原代肿瘤细胞、鼻咽癌亲本细胞株CNE-1以及鼻咽癌紫杉醇耐药细胞株CNE-1/taxol后计数,包埋入胶滴接种于六孔板培养,并进行化疗药物(多西他赛、紫杉醇、顺铂、5-氟尿嘧啶)的接触,之后去除药物,将原代细胞继续培养5-7天后,将胶滴染色固定后风干。3.利用图像分析软件将胶滴图片进行光密度分析,得出化疗药物的有效率。其结果用T/C百分比值表示,T为加药物组的光密度值,C为空白对照组的光密度值,T/C%≤50%示该药物敏感。结果:1.培养出的原代肿瘤细胞,核染色较深,细胞形态大小不一,以团块散在生长,部分细胞之间镶嵌紧密。胶滴内的肿瘤细胞呈三维立体样克隆增殖,具有类似体内的生长形态。2.加药后原代细胞集落部分瓦解,细胞呈空泡状,细胞株未见明显差异改变。3.CD-DST对进行培养的原代细胞标本可评价率为67.39%,包括鼻咽癌的(20/23)86.96%,舌癌的(4/7)57.14%,喉癌的(3/9)33.33%,下咽癌的(3/6)50%。4.CD-DST检测的4种化疗药物单药有效率依次为:多西他赛(45.16%),紫杉醇(41.94%),顺铂(29.03%),5-FU(16.13%)。结论:1.CD-DST法具有标本可评价率高(67.39%),实验细胞需求少(3×103个细胞/滴),临床相关性好等突出特点。对头颈肿瘤的临床个体化化疗方案的制订有参考意义。2.头颈部肿瘤标本中,鼻咽癌检测成功率高,而喉癌,下咽癌检测成功率低,可能与污染及肿瘤生物学特性有关。3.CD-DST法可能不适用于对细胞株细胞化疗药物敏感性的检测。
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