美国黑核桃种质资源变异分析

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美国黑核桃属于核桃科(Juglandaceae)、核桃属(Juglans L.)。因其木材坚硬、结构紧密、花纹优雅、色泽美观及果实风味浓厚,营养丰富而成为美国经济价值最高的材果兼优树种。但由于绝大多数实生黑核桃树生长慢,树势弱,分枝多,干形差,也是一个品种急待改良的树种。本试验采用三年生美国东部黑核桃(Juglans nigra)为试材,对其变异植株分别从植物形态学调查、三年生长量动态变化、光合特性以及DNA分子标记等几个方面进行研究,旨在筛选出适合我国气候条件的速生、优质以及适合做我国核桃砧木的矮生优株,同时为黑核桃育种材料的早期选择与鉴定打下理论基础。主要研究结果如下:(1)对东部黑核桃变异植株的主要植物形态学特征进行调查,结果表明东部黑核桃实生苗在枝条、叶片、芽眼等几个方面产生不同程度的变异,变异基本可分为三类:第Ⅰ类生长速度快叶片面积小;第Ⅱ类生长速度快叶片面积大;第Ⅲ类生长速度缓慢;对照植株定为第Ⅳ类。(2)对四类黑核桃三年内的生长动力学研究表明,第Ⅰ、Ⅱ类黑核桃的基径分别为对照第Ⅳ类的189.9%、212.7%,第Ⅲ类黑核桃的基径仅为对照的64.8%。(3)采用离体叶片法研究了四类黑核桃的光合特性。第Ⅰ、Ⅱ类黑核桃的表观量子效率、RuBP羧化效率及最大净光合速率较大,光合能力最强。第Ⅲ类黑核桃的表观量子效率、RuBP羧化效率及最大净光合速率最小,光合能力最差。在整个生长季节,第Ⅰ、Ⅱ类黑核桃的净光合速率均较高,第Ⅲ类的最低。 (4)采用简化了的CTAB法提取的黑核桃DNA纯度高、质量好,保证了RAPD扩增的稳定性及重复性。适于黑核桃RAPD扩增的程序为:94℃ 2分钟,1个循环;94℃ 30秒,36℃ 40秒,72℃1分钟,44个循<WP=6>环;最后72℃延伸5分钟。优化的RAPD反应条件为:2.5 mmol.l-1 dNTP 1μl,2mmol.l-1 MgCl2 2μl, 1U Taq DNA聚合酶,10pmol引物1μl,RAPD扩增结果的重复性好。(5)RAPD聚类分析结果表明,三类变异黑核桃均为基因型变异,第Ⅰ、Ⅱ类表现为速生型,第Ⅲ类为矮生型,可作为黑核桃育种资源加以应用。(6)从100个引物中筛选出了美国东部黑核桃变异植株中速生型的特征谱带S10600、S8560及矮生型的特征谱带S15520,为今后黑核桃育种材料的早期选择与鉴定提供了依据
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