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龙眼梅(PrunusmumeSiebetZucc.‘longyanmei’)、美国黑李(P.salicinaLindl.)、台湾甜桃(P.persica(L.)Batsch.)和油木奈(P.salicinaLindl.var.cordataJ.Y.Zhangetal.)都是蔷薇科李属的果树,其果实既可鲜食又可加工成果干、果酱和蜜饯等,但都面临一个问题,即采后的果实极易软化,给贮运和加工带来一定困难。为解决这一问题,本研究拟通过同源克隆分离出具有抗软化、抗病虫害等功能的多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因,以构建植物表达载体,为培育抗病、耐贮新品种奠定基础。
本论文分别以龙眼梅、美国黑李、台湾甜桃和油木奈的基因组DNA和cDNA为模板,根据马哈利樱桃和树莓等PGIP基因序列分别设计两对引物(A引物和B引物),进行PCR扩增,均得到这四种果树的基因组DNA和cDNA的多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGKP)基因。
通过PGIPDNA和PGIPcDNA序列比较及开放读码框分析,表明PGIP的所有DNA序列都包含2个外显子和1个内含子,且内含子都符合GT-AG的规律。