实验性葡萄膜炎大鼠眼部IL-23mRNA及IL-17mRNA的表达

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目的研究实验性葡萄膜炎动物模型在各检测时间点眼部表达白介素-23(IL-23)mRNA及白介素-17(IL-17)mRNA的量以及动物模型发病时眼部炎症评分与IL-23mRNA、IL-17mRNA表达变化的相关性,为探讨葡萄膜炎的发病机制提供可能的依据,从而为临床上寻找有效的预防和治疗葡萄膜炎的方法提供参考依据。方法SD大鼠35只,雌性,周龄5~6周,体重180~210克。裂隙灯显微镜下检查眼部排除眼部疾病。大鼠随机分成七组(A~G组),每组5只,A组为对照组,B~G组为实验组。实验组每只大鼠双侧后足垫部位分别注射实验配制液:伤寒内毒素100ug溶于PBS液50ul(PH=7.4)+50ulFreund完全佐剂,A组为对照组双侧后足垫部位分别注射PBS液100ul(PH=7.4)。大鼠注射内毒素后每2小时观察眼部症状变化并记录评分。实验组分别于注射后6小时(h)、12h、18h、24h、48h,60h随机选取一组大鼠处死,取双眼葡萄膜视网膜混合后液氮冷冻,对照组大鼠于注射PBS后24h处死,取双眼葡萄膜视网膜混合并液氮冷冻。标本行RT-PCR半定量检测IL-23mRNA及IL-17mRNA的表达。对IL-23mRNA及IL-17mRNA的表达量与眼部炎症评分做相关性分析。结果实验组大鼠在注射内毒素后4h即可于显微镜下见虹膜血管扩张,6h可见前房轻度闪辉,血管充血加重,虹膜水肿,眼部炎症评分(1.4±0.16)。18~24h可见瞳孔缩小;虹膜高度水肿,血管扩张充严重,渗出明显,部分可见前房积脓,眼部炎症评分最高为(5.4±0.44)。24h后症状逐渐好转,发病率为100%。对照组大鼠各时间点眼部炎症评分无明显变化。实验组大鼠葡萄膜组织中IL-23p19mRNA、IL-12/23p40mRNA及IL-17mRNA的表达比对照组高(P<0.05),差异有统计学意义。相关性分析结果眼部炎症评分与IL-17mRNA表达呈正相关(r17=0.88,P<0.05)与IL-23 p19/p40mRNA表达亦呈正相关性(rp19=0.96,rp40=0.83,P<0.05)。结论:内毒素注射后诱发SD大鼠发生眼部葡萄膜炎的自然病程中,RT-PCR检测提示细胞因子IL-17及IL-23 mRNA表达增加,葡萄膜炎的发病机制与细胞因子IL-17和IL-23有关。其变化与眼部炎症的严重程度成正相关性,提示葡萄膜炎临床症状的严重程度可能受细胞因子IL-17和IL-23表达量的影响。
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