健脾活血法对糖尿病胃轻瘫大鼠胃动力基本功能单位的影响

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目的: 鉴于胃的血流是保障胃动力顺利的关键,因此我们拟通过血流干预药物及健脾活血法之代表方“糖胃康”对糖尿病胃轻瘫大鼠胃动力基本功能单位(胃壁内神经系统、Cajal间质细胞及平滑肌细胞)的影响,揭示糖尿病胃轻瘫发病的内在机制及血流因素在糖尿病胃轻瘫发病机制中的作用,并部分明确“糖胃康”治疗糖尿病胃轻瘫的作用部位、环节及分子机制,为中药防治糖尿病胃轻瘫开辟新方法和理论依据,为临床治疗糖尿病胃轻瘫提供一个有效的中药制剂。 方法: 131只SPF级SD雄性大鼠,随机分为5组,其中正常组10只、模型组22只、止血敏组33只、蚓激酶组33只和糖胃康组33只。所有动物禁食12h后,测空腹血糖,剔除血糖过高或偏离正常值较大的动物,称重。除正常对照组大鼠外,其它大鼠一次性腹腔注射0.1mmol/L柠檬酸一柠檬酸钠缓冲液链脲佐菌素(STZ)造模,注射剂量60mg/kg,正常对照组大鼠单次腹腔注射等容量的0.1mmol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。 至造模后第7天,所有实验大鼠在非禁食情况下剪尾采血,用血糖仪测血糖值,以血糖≥16.7mmol/L为实验纳入标准。符合实验纳入标准大鼠于造模后第10天起,糖胃康组大鼠予“糖胃康”水煎剂灌胃,每日1次;止血敏组大鼠予止血敏注射液灌胃,每日1次;蚓激酶组大鼠予蚓激酶肠溶胶囊腹腔注射,每日1次;模型组和正常组大鼠予等量蒸馏水灌胃,每日1次。每周给药6天。所给药物剂量采用不同种属、不同体重动物剂量换算公式计算,相当于成人临床常用剂量2倍。每天观察并记录动物一般状态(包括饮食、排泄物、分泌物、毛发、精神状态、自主运动、眼白内障、死亡等的变化)。每3周称体重1次,按新体重重新计算给药剂量。实验期为30周。5组大鼠以复合颗粒饲料喂养,自由取食、自由饮水。 实验17周时所有大鼠用血糖仪检测空腹血糖1次。30周后所有大鼠禁食24h后,先用血糖仪测空腹血糖,而后各鼠均给予5ml酚红溶液(1mg/ml)灌胃,30分钟后乙醚麻醉,开胸,心脏取血6ml,不加抗凝剂,4℃自然凝固后,3500rpm-1离心10分钟,取上清,-20℃冰箱保存备用,用于检测血清胰岛素水平、血清C肽水平、血脂(TC、TG、LDL、HDL)及血自由基含量(SOD、MDA)等生化指标;取血4ml,加肝素抗凝,37℃条件下测定血液流变学各项指标。而后拉颈处死大鼠,迅速剖腹,结扎胃贲门和幽门,取出全胃放置于冰上,沿胃大弯侧剪开胃,将胃内残留物收集,用722光栅分光光度计以560nm波长下读取光密度值,计算大鼠胃液体排空率。随即取大鼠胃窦区组织2块,大小约1.0cm×1.0cm,其中1块放入10%中性甲醛固定液中,另1块放入4%多聚甲醛固定液中固定,而后脱水、透明、石蜡包埋、切片、拷片、行HE染色、
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