【摘 要】
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在精液冷冻保存过程中所产生的大量活性氧会使精子的抗氧化系统损伤,从而诱导精子凋亡,使得精子丧失受精能力。因此目前通常使用在精液冷冻保护稀释液中添加抗氧剂的方法来提高精液冷冻保存效果。N-乙酰半胱氨酸（NAC）和十二烷基磺酸钠（SLS）被证实在猪精液冷冻保存过程中起到了保护作用,十二烷基硫酸钠（SDS）可以提高犬精子冷冻保存后的活率。但是,目前关于这三种抗氧化剂对于山羊精液冷冻保存过程中起到的作用尚
【基金项目】
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陕西省重点研发计划（编号:2018ZDXM-NY-040）；
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在精液冷冻保存过程中所产生的大量活性氧会使精子的抗氧化系统损伤,从而诱导精子凋亡,使得精子丧失受精能力。因此目前通常使用在精液冷冻保护稀释液中添加抗氧剂的方法来提高精液冷冻保存效果。N-乙酰半胱氨酸（NAC）和十二烷基磺酸钠（SLS）被证实在猪精液冷冻保存过程中起到了保护作用,十二烷基硫酸钠（SDS）可以提高犬精子冷冻保存后的活率。但是,目前关于这三种抗氧化剂对于山羊精液冷冻保存过程中起到的作用尚不清楚。本试验以萨能奶山羊为试验对象,分析NAC、SLS和SDS对冷冻-解冻前后萨能奶山羊精液冷冻保存效果的影响,从而为这三类抗氧化剂在萨能奶山羊精液冷冻保存技术中的应用提供理论依据和技术支撑。本试验主要获得以下结果:1.在萨能奶山羊精液冷冻保存稀释液中添加不同浓度NAC（0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL）对冷冻-解冻后的精液品质具有积极作用。当稀释液中NAC浓度为0.6mg/mL时,精子冷冻-解冻后的活率和质膜完整率分别为43.19%和48.52%;精子总抗氧化能力（T-AOC）达9.93IU/mL,超氧化物歧化酶（SOD）为220.3IU/mL,过氧化氢酶（CAT）为8.53IU/mL,酸性磷酸酶（ACP）达33.14IU/L,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）达135.4IU/mL,透明质酸酶（HA）355.17IU/L,精子顶体酶（ACE）为5.074IU/L,均显著高于对照组（P<0.05）。同时,代谢产物活性氧（ROS）水平为2968,丙二醛（MDA）为5.241 mm/mL,二者均显著低于对照组（P<0.05）。线粒体膜电位为2.993ΔΨm,显著高于对照组（P<0.05）。2.在萨能奶山羊精液冷冻保存稀释液中添加不同浓度的SLS（0.05、0.1、0.15、0.2、0.25 mg/mL）对冷冻-解冻后的精液品质具有积极作用。当SLS添加量为0.15 mg/mL时精子冷冻-解冻后的活率和质膜完整率分别为45.03%、46.72%;精子总抗氧化能力（T-AOC）达8.90IU/mL,超氧化物歧化酶（SOD）为201.3 IU/mL,酸性磷酸酶（ACP）达34.04IU/L,过氧化氢酶（CAT）为8.23IU/mL,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）达162.2IU/mL,透明质酸酶（HA）421.15 IU/L,精子顶体酶（ACE）为5.476 IU/L,均显著高于对照组（P<0.05）。同时,代谢产物活性氧（ROS）水平为3739,丙二醛（MDA）为5.345 mm/mL,二者均显著低于对照组（P<0.05）。线粒体膜电位为2.983ΔΨm,显著高于对照组（P<0.05）。3在萨能奶山羊精液冷冻保存稀释液中添加不同浓度的SDS（0.05、0.1、0.15、0.2、0.25 mg/mL）对冷冻-解冻后的精液品质具有积极作用。添加0.15 mg/mL的SDS后,精子冷冻-解冻后的活率和质膜完整率分别为46.01%、42.28%;精子总抗氧化能力（T-AOC）达7.30IU/mL,超氧化物歧化酶（SOD）为202.0 IU/mL,过氧化氢酶（CAT）为8.46IU/mL,酸性磷酸酶（ACP）达34.47IU/L,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）达175.92IU/mL,透明质酸酶（HA）452.72 IU/L,精子顶体酶（ACE）为5.793 IU/L,均显著高于对照组（P<0.05）。同时,代谢产物活性氧（ROS）水平为3320,丙二醛（MDA）为5.476 mm/mL,二者均显著低于对照组（P<0.05）。线粒体膜电位为2.750ΔΨm,显著高于对照组（P<0.05）。研究表明,将NAC,SLS和SDS添加到羊精液冷冻稀释剂中,可以减少精子在冷冻过程中的氧化损伤,提高冷冻后精液的品质。同时本研究还优化了最佳浓度。N-乙酰半胱氨酸为0.6 mg/mL,十二烷基磺酸钠为0.15 mg/mL,十二烷基硫酸钠为0.15mg/mL。
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