本研究主要通过对FK506产生菌株Streptomyces tsukubaensis No.9993进行随机诱变和定向选育,筛选FK506高产菌株。同时通过发酵工艺优化对FK506代谢进行调控,提高FK506的产量。利用物理诱变、化学诱变、复合诱变和定向选育的方法筛选高产菌株。结果发现,UV诱变效果较好,突变株遗传性状稳定,其产量为150μg/mL,较对照提高了23.6%。在S.tsukubaensis No.9993发酵过程中添加氨基酸、豆油、稀土元素氯化物和前体结构类似物。结果发现,在发酵初期添加0.16 g/L丙氨酸(Alanine,Ala)和0.1g/L鸟氨酸(Ornithine)能使FK506产量分别提高11.6%和32.1%。对培养基中油脂含量测定发现25 mL培养基中含有油脂量为0.0296 g,可以满足菌体对其生长的要求,故外源添加豆油对FK506产量具有抑制作用。三种稀土元素氯化物中只有氯化镧对FK506产量具有促进作用,产量提高了35.6%。在前体结构类似物的添加中,α-哌啶甲酸乙酯盐酸盐和水杨醇分别使FK506产量提高了20.24%和52.2%。在FK506生物合成过程中,fkbO作为编码分支酸酶的基因,使分支酸形成DHCHC(FK506生物合成起始单位),fkbP主要使长链聚酮化合物环化,形成PreFK506.利用RT-PCR对添加氯化镧和水杨醇后的fkbO和fkbP的表达量进行研究,发现氯化镧对fkbP的影响比较显著,水杨醇对fkbO和fkbP的影响明显。