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目的:研究缺氧条件下,HIF-1与AhR信号通路在A549细胞中的相互作用。方法:(1)采用实时荧光定量PCR法筛选CoCl2作用A549细胞的最佳浓度及时间;(2)采用MTT法筛选B(a)P作用A549细胞的最适浓度范围及时间;(3)A549细胞按1×106个/瓶接种培养瓶中,37℃、5%CO2培养箱中培养24h(细胞基本贴壁)后,加CoCl2及B(a)P溶液,培养一定时间后收集细胞。采用实时荧光定量PCR、Western bolt法检测细胞VEGF、CAⅨ、CYP1A1和CYP1B1 mRNA及蛋白的表达情况,采用免疫沉淀法检测HIF-1α、AhR与HIF-1β/ARNT的结合能力。结果:(1)通过实时荧光定量PCR法检测HIF-1αmRNA的表达情况,筛选出CoCl2作用A549细胞的最佳浓度及时间为300μM作用24h;(2)通过MTT法检测B(a)P对A549细胞增值作用的影响,筛选出B(a)P作用A549细胞的最适浓度范围为0~8μM及时间为24h;(3)300μM CoCl2处理A549细胞后,加入不同浓度B(a)P作用24h,VEGF、CAⅨ、CYP1A1和CYP1B1 mRNA的表达量与对照组相比明显增加,当B(a)P浓度为8μM时,各基因mRNA的表达量约为对照组的5、7、7、12倍,差异具有统计学意义(P<0.01);VEGF、CAⅨ、CYP1A1和CYP1B1蛋白的表达量与对照组相比明显增加,当B(a)P浓度为8μM时,各基因蛋白的表达量约为对照组的4、5、11、8倍,差异具有统计学意义(P<0.01);AhR蛋白与HIF-1β/ARNT的结合能力与对照组相比明显降低,当B(a)P浓度为8μM时,AhR蛋白的结合量约为对照组的32%,差异具有统计学意义(P<0.01),而HIF-1α蛋白与HIF-1β/ARNT的结合能力与对照组相比明显增加,当B(a)P浓度为8μM时,HIF-1α蛋白的结合量约为对照组的3倍,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:缺氧条件下,B(a)P能上调HIF-1信号通路下游基因VEGF、CAⅨmRNA及蛋白的表达,增强HIF-1α蛋白与HIF-1β/ARNT的结合能力,并呈剂量依赖性;B(a)P能上调AhR信号通路下游基因CYP1A1、CYP1B1 mRNA及蛋白的表达,但AhR蛋白与HIF-1β/ARNT的结合能力受HIF-1α信号通路的抑制,并呈剂量依赖性。