【摘 要】
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本文对辽宁大连地区侵染甘薯的双生病毒进行了研究,从田间采集到带有卷叶症状的甘薯,提取总DNA,用检测双生病毒的简并引物—BM对其进行PCR扩增,获得了约2800bp的特征条带,说明这些
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本文对辽宁大连地区侵染甘薯的双生病毒进行了研究,从田间采集到带有卷叶症状的甘薯,提取总DNA,用检测双生病毒的简并引物—BM对其进行PCR扩增,获得了约2800bp的特征条带,说明这些甘薯植株上存在双生病毒。实验表明该染毒材料嫁接到指示植物牵牛上三周后牵牛植株产生卷叶和叶片变黄的症状;病毒可由白粉虱传播,初步认定该病毒是菜豆金色花叶病毒属的甘薯卷叶病毒(sweet potato leaf curl virus,SPLCV),将其命名为SPLCV-CN。 PCR产物中的目的片段经回收纯化后,连接到PMD-T18载体上,将连接产物转化大肠杆菌感受态细胞,提取重组质粒,测序后获得了SPLCV-CN的DNA-A全序列,该序列全长2771bp。对病毒的基因组结构进行的研究表明,其DNA-A基因组结构具有典型的菜豆金色花叶病毒的特点,共编码6个开放阅读框(open reading frames,ORFs),其中病毒链编码AV1和AV2两个ORFs,互补链编码AC1(Rep)、AC2、AC3和AC4四个ORFs;基因间隔区含有双生病毒所共有的茎环结构、保守的9核苷酸序列、TATA盒和三个不完全重复序列,这些结构都是双生病毒复制、转录起始和包装所必需的。三个不完全重复序列的位置同旧世界病毒一致。而由同源性分析得知,SPLCV-CN与SPLCGV-[16]、IYVV和SPLCuV相比对,DNA-A的同源性在88%-91%之间,外壳蛋白的同源性在93%-96%之间。应用生物学软件MEGA3.0中的邻接法和最大简约法进行系统发育分析,针对AV1、AC1和AV2的ORFs氨基酸序列构建树状图,SPLCV-CN与其他三个株系的甘薯卷叶病毒都属同一进化分支。说明SPLCV-CN是甘薯卷叶病毒的不同株系。这是该病毒在中国大陆的首次发现。基因组DNA-A结构特点和系统进化分析表明甘薯卷叶病毒属于旧世界病毒。
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