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背景:急性肝衰竭(ALF)是由于严重肝细胞损伤所导致凝血功能障碍和不同程度的肝性脑病,并最终产生致死性的结局。在肝衰竭患者中,血小板快速下降是个常见的临床现象。急性肝衰竭时,血小板数量的快速下降与全身炎症反应、多器官衰竭、及短期病死率密切相关。D-氨基半乳糖(D-GalN)是一种特殊的肝细胞尿苷核苷酸阻断剂。Toll样受体(TLR)包含了一大类先天免疫识别受体,它们识别微生物成分并通过特征明确的信号级联传播。LPS/D-GalN是一种常用的急性肝衰竭动物模型,与临床急性肝衰竭非常相似。当给予LPS/D-GalN诱导的急性肝衰竭小鼠阻断血小板黏附的安菲博肽(Agkisacucetin)和阻断血小板聚集的替罗非班(tirofiban),均可不同程度的的改善LPS/D-GalN小鼠的生存。除LPS/D-GalN 外,对乙酰氨基酚(APAP),刀豆素 A(ConA),poly(I:C)/D-GalN 和CpG DNA/D-GalN也是常见的急性肝衰竭模型。方法:建立 LPS/APAP,LPS/ConA,poly(I:C)/D-GalN,和 CpGDNA/D-GalN诱导的急性肝衰竭模型,使用安菲博肽和(或)替罗非班干预,观察是否对急性肝衰竭小鼠有救治作用。使用定量蛋白组学对LPS/D-GalN,poly(I:C)/D-GalN和CpG DNA/D-GalN三个模型小鼠的肝组织检测分析以揭示toll样受体激动剂联合D-GalN诱导的急性肝衰竭的可能机制,用肝组织免疫荧光验证相关标记物的表达。结果:我们成功构建了 LPS/APAP,LPS/ConA,poly(I:C)/D-GalN 和 CpG DNA/D-GalN四个急性肝衰竭模型。实验结果显示安菲博肽和(或)替罗非班对除LPS/D-GalN以外的四个急性肝衰竭模型均无救治作用。其中,poly(I:C)/D-GalN和CpGDNA/D-GalN在造模后小鼠血清谷丙转氨酶水平,肝组织损伤程度和死亡时间上与LPS/D-GalN模型相似。全蛋白组学数据显示与健康对照组相比,LPS/D-GalN,poly(I:C)/D-GalN,CpGDNA/D-GalN 急性肝衰竭模型在造模2小时分别鉴定出208、89和121个差异表达蛋白;其中有24个蛋白为共同表达蛋白,153,36和51个模型特异性的蛋白。在造模4小时时分别鉴定出321、227和114个差异表达蛋白;其中有52个蛋白为共同表达蛋白,80,195和23个模型特异性的蛋白。虽然这三个D-GalN相关的急性肝衰竭模型表型相似,但在差异蛋白注释分类,血小板和凝血级联反应等功能富集通路上表现出明显的差异。其中α-2-抗纤溶酶,α-1-抗胰蛋白酶,甘露糖结合蛋白A和高亲和力免疫球蛋白ε受体亚单位γ等凝血相关蛋白在LPS/D-GalN模型中特异性表达;炎症相关蛋白乳铁转运蛋白,S100a9,中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白,整合素alpha-M,膜联蛋白A1,髓过氧化物酶在LPS/D-GalN模型中显著性表达。结论:抗血小板药物安菲博肽和(或)替罗非班对于急性肝衰竭小鼠的救治作用与模型和疾病状态相关。LPS/D-GalN,poly(I:C)/D-GalN和CpG DNA/D-GalN诱导的小鼠急性肝衰竭虽然表型相似,但致病机制有很大的差异,包括凝血和炎症水平的差异,针对相关蛋白的进一步研究,将有助于了解抗血小板治疗LPS/D-GalN小鼠的机制。