不吸水链霉菌公主岭变种次级代谢产物的分离与鉴定

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不吸水链霉菌公主岭变种(Streptomyces ahygroscopicus var.gongzhulingensis)是一株发酵工艺成熟、有田间实际应用基础的抗生素产生菌。在前期研究中首次发现该菌株发酵产物的提取物对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的增殖具有显著的抑制作用。本论文首先采用有机溶剂渗漉提取制备了不吸水链霉菌公主岭变种固态发酵产物的提取物,之后采用液-液萃取进行初步分离,根据半叶枯斑法测试结果表明,活性成分主要集中在二氯甲烷和乙酸乙酯(200μg/m L浓度时,枯斑抑制率分别为87.2%和93.4%)萃取部分。进一步通过吸附柱层析、正相和反相硅胶柱层析,结合葡聚糖凝胶过滤等方式,对该菌株的次生代谢产物进行分离和纯化。根据核磁共振波谱数据分析初步确定了11种化合物结构,包括诺卡胺素(1)、3-[2-(3,5-二甲基-2-羟基-1-环己烯基)-2-氧代乙基]戊二酰亚胺(2)、放线菌酚(3)、3-[2-(3-甲基-5-羟甲基-2-氧代环己基)-2-羟基-乙基]戊二酰亚胺(4)、3,4-二甲基-2-(1-氨基甲基)-γ-丁内酯(5和6)、3-羟基-4-(1-羟基乙基)-γ-丁内酯(7)、苯乙酸(8)、2-甲氧基-苯乙酸(9)、9,12,13-三羟基-10(E)-十八烯酸(10)、8,9,10-三羟基-6(Z)-十八烯酸(11)。上述化合物中包括1个氧肟酸盐型铁载体(1);3个戊二酰亚胺类抗生素(2、3和4);3个含有五元内酯环的化合物(5、6和7);2个酚类物质(8,9)以及2个不饱和长链脂肪酸(10,11)。其中化合物5和6互为同分异构体,化合物10和11互为同分异构体,化合物4、5和6暂无相关文献报道,为首次发现的新化合物。不吸水链霉菌公主岭变种发酵产物是难得的既能促进作物生长、对作物安全性高,同时对病毒增殖具有高效抑制作用的研究材料。本论文研究结果表明不吸水链霉菌公主岭变种次生代谢产物的化学结构具有一定的独特性和多样性,为进一步明确其次生代谢产物中具有抗病毒活性的天然产物,研究并阐明活性成分的抗病毒作用机制奠定了初步的研究基础。
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