目的心脏是循环系统中的一个重要的器官,它的跳动为我们的生命的延续提供最基础的动力。心血管疾病在当今社会越来越多发,并且会危及大部分患者的生命。随着心脏疾病的发病率增加,人们对于心脏疾病治疗的研究越来越多,而心脏疾病的主要原因是心血管病变,因此使用细胞疗法对破坏的心脏血管的修复成为研究热点。本实验选用小鼠Sca-1~-/CD31~-心脏侧群细胞(Cardiac Side Population cells,CSP)在体外进行增殖培养和诱导分化,并使用不同浓度的红景天苷对其增殖培养进行干预,探讨该细胞在体外增殖、分化能力以及红景天苷对其增殖的影响。方法1.收集心脏细胞,通过流式细胞仪对目的细胞进行分选。2.通过实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)方法对特定基因的检测。3.细胞克隆实验检测红景天苷对细胞增殖能力的影响。4.通过q PCR方法检测增殖的细胞的祖细胞特定基因并与刚分离出来的细胞进行比较。5.体外培养诱导细胞分化,通过qPCR方法检测分化培养的细胞的内皮细胞特定基因的表达情况。6.免疫荧光技术检测细胞分化的结果。结果1.通过流式细胞术分离出Sca-1~-/CD31~-CSP。2.通过qPCR方法检测细胞的相关特定基因结果显示Sca-1~-/CD31~-CSP表达ABCG2和CD133,不表达Nkx2.5、Tie2和VEGFR2。3.细胞克隆实验结果显示细胞具有克隆增殖能力,红景天苷对Sca-1~-/CD31~-CSP的增殖能力有促进作用。4.通过q PCR方法检测克隆实验培养的细胞与新鲜分离的细胞都存在ABCG2和CD133,同时不表达Sca-1。5.细胞体外培养诱导分化后,qPCR方法检测分化后的细胞的特定基因结果显示,细胞不表达ABCG2和CD133,表达Tie2和vWF。6.通过免疫荧光试验检测到vWF。结论Sca-1~-/CD31~-CSP细胞具有体外增殖分化能力,可检测到内皮祖细胞的特定基因,因此可以作为内皮祖细胞。红景天苷对小鼠细胞在体外的增殖过程中具有一定的促进作用。