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本课题采用多菌混合液体发酵的工艺来生产液态复合微生态制剂,此种混合发酵具有多菌共生、酶系互补、作用全面、省工节能、简化工艺的特点。经大量的前期准备工作,本试验对筛选出的能用于混合培养的两株酵母菌、一株球菌和两株芽胞杆菌的耐受性和拮抗病原菌特性进行了测定。并在对菌种发酵条件进行研究的基础上,应用微生态学原理,初步确定了多菌种混合液体发酵的工艺,以适合大规模工业化生产微生物饲料添加剂的技术路线和培养方法。 结果表明:除球菌外其它菌株对pH值均有良好的耐受性,在酸化培养基中分别培养3h后计数,pH值3.0时仍能保证40%以上存活;而混合培养的菌液对大肠杆菌和金黄葡萄球菌仍发挥较强的抑菌作用;在贮存试验中,将发酵好的混合菌液置于冰箱内(4℃)保存,通过对菌剂的定期检测,其保存期可达到120d。在对5株菌种分别进行的摇瓶和5L发酵罐的混合发酵试验中,充分利用各菌种之间的协作共生关系,初步确定了多菌种混合液态发酵生产微生态制剂的生产工艺,即混合发酵的温度为35℃,搅拌转速为200r/min,接种量为5%(V/V),接种顺序为先接种酵母菌和球菌,之后再接种芽孢杆菌。 在上述试验的基础上,对液态复合微生态制剂又进行了养殖应用试验。同时与自行研制的其它两种固态复合微生态制剂作以比较。试验选取大连础明集团七顶山基地的长×约二元杂交的断奶仔猪40头,饲喂含0.3%固态复合微生态制剂A和B,0.3%和0.5%液态复合微生态制剂的试验日粮和对照日粮(不含抗生素及微生态制剂的日粮)。通过对生产性能指标,养分代谢指标的测定,组织学观察以及微生物检测,研究了微生态制剂对断奶仔猪的生长性能、养分代谢率、小肠微绒毛及肠道内pH值和微生物变化等的影响,探讨了不同微生态制剂与仔猪生长发育的关系和对养分代谢的影响,为研究有关多菌种混合液体发酵生产微生态制剂工艺的可行性提供了一定的理论与实践依据。 试验结果表明:微生态制剂对断奶仔猪增重和饲料利用率的提高有良好的促进作用。平均日增重较对照组提高41.12%-51.78%(P<0.01),试验组之间,微生态制剂A的结果较突出,其次为液态制剂,不同添加水平的液态制剂组之间,0.5%添加量要优于0.3%添加量(P>0.05)。饲料利用率较对照组提高28.15%-45.08%(P<0.01),其中微生态制剂A和0.5%液态制剂极显著高于微生态制剂B(P<0.01),微生态制剂A与0.3%液态制剂之间差异也极显著(P<0.01)。