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肿瘤多药耐药（Multidrug Resistance，MDR）已经成为化疗成功的障碍，也是困扰着肿瘤学家和癌症患者的一个重大问题。MDR的机理包括转运蛋白PgP，MRP，LRP及MXR的过量表达导致的肿瘤细胞内药物积聚的减少，胞内解毒系统能力的增强，以及药物作用靶点的改变等。其中最典型的是由于ATP依赖的外排“泵”PgP的过量表达。 本论文以建立的PgP过量表达的MDR人红白血病K562／ADR细胞模型为基础，采用MTT检测方法对建立的30种中草药单体样品库进行定向筛选，以期得到一种具有逆转MDR活性的单体，并进一步研究其药理作用。 1．利用抗肿瘤药物阿霉素诱导K562建立MD亚系K562／ADR，经检测对阿霉素耐药7.8倍，长春新碱耐药60倍以上，表阿霉素98倍。并且经过耐药谱的检测，胞内阿霉素的积聚以及Pgp的检测三种手段都同时表明，该细胞模型的MDR机理是膜蛋白Pgp的过量表达而导致的，其表达量与阴性对照组相比高达88.79％。 2．利用MDR细胞模型K562／ADR对由30种中草药单体组成的样品库进行MDR逆转制剂的初筛和复筛，我们发现穿心莲内酯在6μg／ml浓度下无细胞毒性（存活率＞90％），有一定的逆转MDR作用，但效果不强。而丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、二氢丹参酮Ⅰ、紫草素则具有细胞杀伤作用，而以紫草素的杀伤作用最强，和厚朴酚兼有杀伤和逆转作用，但都不是很强。 3．确定紫草素为研究对象，我们发现紫草科多年生草本植物紫草的有效成分单体紫草素具有非常强的抗多药耐药肿瘤细胞的功能。细胞经紫草素诱导后，基因组DNA琼脂糖凝胶电泳图中Ladder及流式细胞仪分析图中亚二倍体峰的的出现，染色后油镜观察细胞形态上的变化，及Caspase-3酶的激活，这些都表明紫草素的抗肿瘤作用机理是诱导细胞发生凋亡，并且经比较具有对亲本细胞K562和耐药细胞K562／ADR效应相当的特点。同时通过MTT检测紫草素对两种细胞的杀伤作用所得IC50非常接近，分别为0.436μg／ml和0.445μg／ml，而HPLC检测胞内药物积聚和滞留浓度表明紫草素被吸收转化为某种化合物，并且该化合物的浓度随时间浙江大学硕士学位论文 变化关系对两种细胞是一致的。这进一步说明紫草素对两种细胞的作用 相当。 结论:通过药物筛选，我们发现了中草药单体紫草素具有诱导敏感细胞K562和MDR细胞K562从DR凋亡的抗肿瘤作用，并且对两者的效应相当，具有克服MDR的特点。并且对可能的诱导凋亡途径作了探讨，对有些还未明确的结论提出了下一步的设想。